MyoG和My6转基因小鼠模型制作、鉴定及相关研究.pdf

曼曼曼曼曼曼皇暑曼曼寰量量皇皇曼曼曼鲁量曼量皇曼曼曼曼曼曼寰曼曼曼舅-‘口Z’-7气7 目 录 中文摘要……………………………………………………………………………………………．．I 英文摘要……………………………………………………………………………………………III 1引言………………………………………………………………………………………………1 1．1肌肉生成概述………………………………………………………………………………．1 1．1．1胚胎骨骼肌的发生……………………………………………………………………．．1 1．1．2成体骨骼肌的发育……………………………………………………………………．．2 1．2MRFs家族研究进展…………………………………………………………………………2 1．2．1 MRFs家族及结构特征…………………………………………………………………2 1．2．2 MRFs家族表达模式……………………………………………………………………2 1．3MyoG及Myf6基因的研究进展……………………………………………………………3 1．3．1 MyoG及Myf6基因的结构及定位……………………………………………………．3 1．3．2 MyoG基因的功能………………………………………………………………………3 1．3．3 Myf6基因的功能………………………………………………………………………．4 1．4转基因技术的研究进展……………………………………………………………………．4 1．5本研究的目的及意义………………………………………………………………………．5 2材料与方法………………………………………………………………………………………．6 2．1真核表达载体的构建………………………………………………………………………．6 2．1．1实验材料………………………………………………………………………………．．6 2．1．2实验方法………………………………………………………………………………．．7 2．2MyoG转基因小鼠和Myf6转基因小鼠的制备…………………………………………一ll 1 2．2．1实验材料………………………………………………………………………………1 2．3MyoG转基因小鼠和Myf6转基因小鼠的鉴定…………………………………………．．12 2．3．1实验材料………………………………………………………………………………12 2．3．2实验方法………………………………………………………………………………12 2．4Real．timeRCR检测外源基因的表达变化…………………………………………………14 2．4．1主要试剂………………………………………………………………………………14 2．4．2主要仪器………………………………………………………………………………14 2．4．3实验方法………………………………………………………………………………14 2．5Westernblot检测蛋白表达…………………………………………………………………15 2．5．1实验材料………………………………………………………………………………15 2．5．2实验试剂………………………………………………………………………………16 2．5．3主要实验仪器…………………………………………………………………………16 2．5．4实验方法………………………………………………………………………………16 2．6绝对定量PCR技术检测外源基因的拷贝数……………………………………………．．17 I 东北农业大学理学硕士学位论文 2．6．1试剂盒及其他试剂……………………………………………………………………17 7