Sox2对Trgs的招募及对肿瘤微环境的影响.pdf

中文摘要 中文摘要 目的：在肿瘤发生发展的过程中，存在很多因素阻碍免疫系统发挥对肿瘤 细胞的杀伤作用。除了肿瘤细胞本身的免疫逃逸，肿瘤微环境中的免疫抑制细 T 胞——调节性T细胞(Regulatorycells，Tregs)也起到了重要作用。目前， 肿瘤细胞对Tregs招募作用的机理是当前肿瘤免疫的研究热点之一。转录因子 SOX2是维持胚胎干细胞及肿瘤干细胞多样性的重要基因，并且已经证实， SOX2在多种肿瘤的发生及转移进程中起了重要作用。肿瘤干细胞样细胞如何 招募作用及其分子机理。 方法：首先，本实验运用免疫组化的方法分别检测了225例乳腺癌组织、 45例癌旁组织、17例正常乳腺上皮组织、9例转移淋巴结组织及9例无转移淋 巴结组织中SOX2和Foxp3的表达情况。其次，建立了Sox2基因沉默的稳定细 胞系，通过实时定量PCR检测了细胞系中与Tregs招募相关的细胞因子， 募作用及其对相关细胞因子表达的影响。再次，运用Westernblot和Real．time 后，使用FACS、免疫荧光及Real．timeRT．PCR分析肿瘤组织和脾脏中T细胞 比例的变化，同时检测Thl、Th2相关细胞因子的表达变化，证明Sox2对肿瘤 微环境的重塑。 ． 结果：我们发现在肿瘤组织中有44．1％的标本表达Foxp3，且其表达水平 与SOX2的表达水平正相关；体内和体外实验均表明，Sox2基因沉默后，其对 Tregs的招募作用会明显下降，同时，与Tregs招募相关的细胞因子CCLl、 的降低及CD8+T细胞的增加而降低；同时，Yhl相关的标志分子表达量增加， 因子，发现小鼠肿瘤中Tregs的比例增加，并恢复了由沉默Sox2对肿瘤微环境 造成的影响。这些结果说明，Tregs在Sox2对肿瘤微环境调控的过程中发挥了 号通路，发现Sox2可以对其进行调控，在沉默Sox2的细胞系中，NF．kB信号 I 中文摘要 通路的活性降低。这些结果支持了我们的假设，即Sox2对Tregs具有招募作 用且对肿瘤微环境造成影响。 结论：我们的实验证明Sox2可以招募免疫抑制性细胞Tregs，从而完成对 肿瘤微环境的重塑，因此靶向Sox2重塑肿瘤微环境可能为乳腺癌治疗提供新 的理论依据。 关键词：Sox2乳腺癌Tregs肿瘤微环境 垒!!坚堕 ———————————————————————————一 Abstract 一 factors of play and tumor，several initiation the progression Objective：During antitumor thetumor rolesinsuppressingimmunity．In import孤t immune in from survlllencce， tumorcells the of escaping capability (TME)．besides