中华绒螯触SeenoproteinM基因克隆和组织表达分析.pdf

中文摘要 俗称河蟹、毛蟹、大闸蟹等。中华绒螯蟹的自然分布区主要分布在亚洲的北部 的朝鲜和中国等海域。在我国的分布区主要北起辽宁鸭绿江口，南至福建的九 龙江、向西直到湖北宜昌的三峡口均有广泛的分布。早在1000多年前我国古代 人民就已经对它的生活习性，尤其是生殖洄游的规律有了相当的记载。中华绒 螯蟹为我国特产，营养丰富，风味独特。不仅国内驰名，而且蜚声海外，所以 我国人民就视它为水产珍品。是我国的一种重要的经济蟹类。 硒广泛存在于自然界生命体内，包括真核生物，原核生物，细菌内均有发 现。在真核动物体内，硒蛋白经常起到体内抗氧化剂的功能。但是在植物和真 菌(除绿藻衣)内硒蛋白含量很少或是缺乏。近年来，硒蛋白的研究取得了重 大成果，大量文献记载Se与动物体的生殖系统密切相关，Se的缺失可以导致 雄性动物的生殖器官发育受阻、影响精子的产生、精液内精子的数量、精子的 活力等，对于雌性动物而言，现有研究表明缺Se可以导致雌性动物生殖周期紊 乱、繁殖力降低且降低幼崽的成活率。硒蛋白M(SelM)是一种含硒代半胱氨 酸的，参与氧化还原反应的有抗氧化功能的蛋白质。但是关于硒蛋白M在海洋 无脊椎动物，尤其是甲壳类动物体内的生理功能方面的研究十分有限。因此本 文研究了硒蛋白M在中华绒螯蟹(河蟹)这一拥有重要商业价值的水产养殖品 种生殖方面的功能。根据本实验室构建的中华绒螯蟹肝胰腺eDNA文库中已标 eDNA全长， 注的EST序列，利用PCR技术克隆了全长为982bp的硒蛋白M 其中包含390bp的开放阅读框，编码129个氨基酸。我们对硒蛋白M在中华绒 螯蟹体内各组织中的表达情况进行观察，发现硒蛋白M在肠、肝胰腺、精巢和 卵巢中的表达量较高。基于以上信息，在实验中检测了硒蛋白M在卵巢、精巢、 肝胰腺和血淋巴中不同阶段的表达情况。在本实验中，成功的从中华绒螯蟹中 克隆出了硒蛋白M，并且证明了硒蛋白M确实在中华绒螯蟹性腺快速发育阶段 参与生殖作用。 关键词：中华绒螯蟹，SelenoproteinM；基[]，组织表达 I ABSTRACT mitten knownas water Chinese sinensis)alsohairycrab，fresh crabs(Eriocheir in northern westernKoreaandChin乱In live the Asia,include crabs，theymainly in crabdistributedfromNorthofYaluRiverin tosouthXiamen． China,this Liaoning As as1000 havethe habitsofChinese early yearsago，Chinesepeoplegot living mitten habits．Inrecent Chinese crabs，especiallyreproductivemigratory years，the mitten of flavonNot crab勰aspecialty only domesticwell—knownandrenowned tosee o