中心粒重新定位温石棉处理诱发的HeLa细胞胞质分裂失败过程中被阻断.pdf

摘要 摘要 温石棉作为一种可以导致恶性间皮瘤的强烈致癌剂，而广为人知。与此同时， 温石棉诱发的双核细胞被认为是导致非整倍体和细胞转化的过渡阶段。然而，温石 棉是通过什么样的内在机制来诱发细胞发生双核化的，仍旧不为人所知。以往的研 究表明，在post-anaphase 时期，中心粒有一个向中间体处重新定位的运动过程，这 个过程对于接下来胞质分裂的完成是至关重要的。为了研究温石棉处理是否会扰乱 正常的中心粒运动过程，我们利用活细胞实时摄影技术来跟踪温石棉诱导的 HeLa 细胞双核化过程中的中心粒的运动情况。为了更好的显示中心粒和细胞核物质，我 们在 HeLa 细胞中有针对性地稳定表达绿色荧光蛋白（GFP ）标记的centrin1 蛋白和 红色荧光蛋白（mCherry ）标记的H2B 组蛋白。结果表明，如同预期一样，温石棉 处理可以在不同的细胞系当中诱发明显的双核化效应，而双核细胞一般是通过胞质 桥退化来产生的。同时，在温石棉处理的细胞中，中心粒运动显示异常的细胞比例 显着上升，而且中心粒的运动也同时被延滞。更重要的是，我们观察到在温石棉处 理的细胞中，中心粒的异常运动与胞质分裂沟退化和双核化之间具有密切的关系。 综上所述，在胞质分裂过程中，正常的中心体向中间体重新定位可以被温石棉处理 所阻断，也许这一点从某种程度上可以解释为什么温石棉能够诱发双核效应。 关键词：温石棉 双核细胞 胞质分裂失败 胞质分裂沟退化 中心粒重新定位 活细胞实时摄影 Abstract Abstract Chrysotile is a well known carcinogen which could induce malignant mesothelioma. Meanwhile, chrysotile induced binucleated cells are thought to be a potential precursor towards aneuploidy and cell transformation. However, the intrinsic mechanism of chrysotile induced binucleation is still unknown. Previous studies suggested that centriole repositioning to midbody during post-anaphase was essential for the following completion of cytokinesis. To investigate whether the centriole movements are disturbed by chrysotile treatment, we utilized live cell imaging to track centriole dynamics during chrysotile-induced binucleation in HeLa cells. For better visualization of centrioles and nuclear materials, green fluorescent protein (GFP) targeted centrin1 and red fluorescent protein (mCherry) targeted histone H2B were stably expressed in HeLa cells. Firstly, chrysotile treatment potently induced binucleation through cytoplasmic bridge regression, as expected. Meanwhile, the proportion of cells displaying aberrant centriole movement was significantly