人冠状病毒HCV-229E非结构蛋白nsp10的结构研究和SARS抗病毒药物开发.pdf

摘要 摘要 自从2003年SARS病毒席卷全球，并在大陆和香港地区造成了巨大损失和社 会恐慌后，全球在接下来的5年期间对SARS病毒开展了系统性的研究，由此也再 次带动了对SARS病毒所属的冠状病毒家族的研究热潮。对冠状病毒致病机理的 研究和药物开发不仅仅在科学和经济上具有很高的价值，对于我国的国家安全 同样具有战略意义。 · 以往对SARS病毒致病机理的研究表明，冠状病毒是通过由16个非结构蛋白 (Non-structure protein，nsp)组成的巨大的转录机器来实现病毒在宿主体 内的侵染和病毒自身的复制。在这16个非结构蛋白中，nsp5，nsplO，还有 nsp7／nsp8复合物都扮演了重要的角色。目前，SARS病毒属的这些蛋白已经得到 是空白，这也是本篇文章将要介绍的内容。 载体在E Superdex75分子筛和ResourceQ阴离子交换柱进行了纯化并获得了衍射良好的 晶体，最终我们解析了三维结构。结构分析发现，HcoV-229E的nsplO蛋白与先 前解析的SARS病毒的nsplO结构高度吻合，都具有4个螺旋和折叠片层结构，此 外还有两个相同的锌指结构。这意味着这两个侵染人类的病毒具有相似甚至相 同的治病机理。此外，我们还对SARS病毒的nsp5进行了药物开发方面的研究。 在研究组前辈的基础上，我们对一个小分子药物(N3)进行了细胞水平的药效 学研究和毒性研究，并建立了动物血浆中的检测方法。这些工作对于N3药物开 发起到较好的推动作用。 关键词：冠状病毒，非结构蛋白，SARS，蛋白质晶体，小分子药物，细胞 毒性实验，药物代谢实验 Abstract Abstract Anewdiscovered Acute disease，SevereRespiratory acrossthewholeworldandcaused tremendousandsocial inChinain damages panic 2003．Inthenext5 started onSARSvirusand years，scientistssystematicstudy focused ontheCoronavirus whichSARSviruscame．The again family,from researchand Coronavimshave pathogenesis drugdevelopmentagainst familygreat valueinbothscienceresearchandnational securitystrategy． Coronavirushaveahuge of16mature transcriptioncomplexconsisting non—structureand the thecriticalroleintheviruslife in proteins complexplays cycle hostcells．All16 thesenon-structurecomefromtwo calledla proteins pre-protein