复合电纺丝、荧胶束、功能化微球的生物活性研究.pdf

摘要 摘要 本硕士论文分三部分，第一部分是关于由聚(L．乳酸)(PLLA)、胶原(Coll) 和羟基磷灰石(HA)组成的复合纳米电纺丝支架的生物相容性研究。应用于组 织工程的具有纳米结构的复合电纺丝支架通过电纺技术制作成功，聚(L乳酸) 分别与胶原或羟基磷灰石单独混合，或PLLA与两者一起混合，构成了复合电 纺丝的组成成分。电纺丝通过扫描电镜分析，X．射线光电子光谱法，水接触角 测量，傅立叶变换红外光谱，拉伸测量测定其表面形态、化学和拉伸特性。由 PLLA和胶原和／或羟基磷灰石组成的复合电纺丝支架具有良好的相互交联的孔 nlTl，可以模仿细胞外基质(ECM)的纳米结构和化 网结构，其直径为200．700 学环境。电纺丝支架中胶原的存在增加了其亲水性，并促进了细胞的贴附与增 殖，而羟基磷灰石则增强了支架的机械拉伸性能。电纺丝支架的细胞贴附特性 通过4’，6二脒基．2．苯吲哚盐酸(DAPI)核染法测定，其上贴附细胞的活性通过 丝支架上的活细胞密度更高，因而PLLVC011／H渔纳米纤维支架因具有足够的机 械强度与良好的生物相容性，最有希望用于组织工程。 征以及其应用于生物体成像和体外细胞毒性研究。制作成功了包裹荧光素的两 亲性嵌段共聚物纳米胶束，通过紫外吸收荧光发射光谱、原子力显微镜测量对 两亲性嵌段共聚物纳米荧光胶束进行表征。在体内研究中，将斑马鱼(Danio rerio)置于荧光胶束的溶液中，通过口腔摄入荧光胶束，再利用荧光显微镜观测 其在斑马鱼体内的生物成像及分布。在体外实验中，荧光胶束在体外与未分化 的大鼠嗜铬细胞瘤PC．12细胞一起孵育后用膜片钳技术对细胞膜钾离子通道进 行全细胞膜片钳记录。这些研究表明DED实现了对荧光素的高效率包裹，并能 将荧光素携带入活的PC．12细胞与斑马鱼体内，从而提供了对活细胞和动物组 织进行成像的独特方法。DED．F可以被应用于生物领域，例如生物成像。由于 DED．F胶束具有很高的包裹效率与持续释放疏水的药物分子的能力，因此这种 摘要 胶束同样可以作为潜在的药物载体，用于靶向释放药物。 第三部分是关于聚乙烯亚胺(PEI)．功能化的不同直径的聚(乙二醇二甲基 微球并用作基因转染载体，且这两种不同直径的功能化微球在基因转染效率和 的羧基之间的静电相互作用与氢键相互作用而实现功能化修饰。直径分别为69 nin和160 反应合成。通过动态光散射和琼脂糖凝胶电泳检测验证了PEI对 胞毒性通过MTT检测和FDA．PI双染法测定。复合微球的PEI含量达到30％， P1．PEI微球和P2．PEI微球表面带有+32mV的正电荷，可以通过与DNA间的强 烈静电相互作用而作为基因转染载体，微球的粒径大小和浓度的高低都对基因 转染效率和细胞毒性有较大的影响。 关键词：生物相容性生物成像细胞毒性基因转染 Ⅱ Abstract Abstract This consistsofthree first isaboutthe ofthe study parts，thepart biocompability nanofibrousscaffolds of compositeelectrospun composed scaffoldsof collagen(Coll)andhydroxyapatite(HA)．Nanostructuredbioeomposite PLLAblended or bothfortissue wi也collagenhydroxyapatite，or engineering fabricated scaffoldswere application