大豆黄酮和酸性对人肝癌SMMC7721细胞增殖及肿瘤干细胞CD133表达的影响.pdf

3 大豆黄酮和酸性肽对人肝癌SMMC7721细胞增 殖及肿瘤干细胞CDl33表达的影响 硕士研究生 沈永杰 硕士生导师 安玉会鲍玉洲 郑州大学基础医学院 河南 郑州 45000l 摘要 背景和目的： 肝癌是临床上最常的见恶性肿瘤之一。其死亡率在消化系统恶性肿瘤中列第 3位。我国是世界上肝癌发病比较集中的国家，每年新发病例数约占全球的·45％。 由于肝癌恶性程度高，发展迅速，治疗困难，病死率高，始终是我国医学界研究 的重大课题。 目前对肝癌的治疗方法主要有手术、放疗、化疗及生物治疗等手段，但总体 治疗效果尚不理想。肿瘤干细胞的发现使人们对肿瘤有了新的认识。人们认识到 肿瘤起源于肿瘤干细胞。肿瘤的形成是肿瘤中的肿瘤干细胞增殖的结果。这些细 胞虽然在肿瘤组织中的数量非常少，只占肿瘤组织中细胞总数的1％，但他们具 有耐药性和不断增殖为肿瘤组织的能力。因此，只有消灭这些细胞才可能彻底治 愈肿瘤。 肿瘤干细胞最早在血液病急性髓细胞性白血病中被发现，其细胞表面存在着 特异性的标志物。随后在乳腺癌，脑肿瘤，前列腺癌以及肺癌组织中也相继发现 了肿瘤干细胞。肿瘤干细胞表面存在着多种肿瘤标记物。其中应用最广泛的是 CDl33。一些报道显示，CDl33阳性的细胞与肿瘤的发生发展，浸润转移和耐药 性的产生都有密切的关系。肿瘤干细胞不仅存在于肿瘤组织中，也存在于体外培 养的肿瘤细胞系中。 己糖激酶是一种磷酸化己糖特别是葡萄糖的酶。而葡萄糖是大多数组织和器 官通过糖代谢获得能量的主要物质。葡萄糖经磷酸化生成6．磷酸葡萄糖，这是糖 代谢的第一步。碱性磷酸酶是一种催化核酸、蛋臼等分子去除磷酸基团的酶。己 糖激酶和碱性磷酸酶的活性反映着细胞的代谢能力。在肿瘤细胞中，己糖激酶和 碱性磷酸酶的活性通常都是高的。 大豆黄酮和酸性肽具有抑制肝癌细胞增殖的作用，但是否抑制肿瘤干细胞中 CDl33的表达，尚未见报导。故此，本实验对大豆黄酮和酸性肽对肿瘤细胞增 殖和肿瘤干细胞CDl33的表达影响做了初步探讨。 材料及方法： 1．人肝癌SMMC7721细胞培养，以获得对数生长期的细胞。 2．将大豆黄酮和酸性肽配置成100p u 1．t u g／ml、200g／ml、300 g／ml、400g／rra u 和500 g／ml浓度，并处理对数生长期的细胞24小时，48小时和72小时，并采 用MTT法测定细胞的成活率，并绘制细胞生长曲线。 3．大豆黄酮和酸性肽分别处理对数生长期的人肝癌SMMC7721细胞，用试 剂盒法测定人肝癌SMMC7721细胞中的己糖激酶和碱性磷酸酶的活性。 4．大豆黄酮和酸性肽分别处理对数生长期的人肝癌SMMC7721细胞，用 Western Blotting方法检测CDl33的表达水平。 结果： 1．用大豆黄酮和酸性肽处理人肝癌SMMC7721细胞，均对其增殖具有抑制 作用，并且抑制作用与浓度密切相关。 2．用大豆黄酮和酸性肽处理人肝癌SMMC7721细胞，均抑制人肝癌SMMC． 7721细胞中的己糖激酶和碱性磷酸酶的活性． 3．Western Blot检测结果显示，大豆黄酮和酸性肽可降低人肝癌肿瘤干细胞 中CDl33的表达。 结论： 1．在实验浓度上，大豆黄酮和酸性肽均有抑制肝癌SMMC7721增殖的作用， 且这种抑制作用与浓度密切相关。 2．在实验浓度上，大豆黄酮和酸性肽能够抑制肝癌SMMC7721细胞己糖激 酶和碱性磷酸酶的活性。．． 3．在实验浓度上，+大豆黄酮和酸性肽可降低人肝癌肿瘤干细胞中CDl33的 表达。 关键词：大豆黄酮；