小鼠大脑神经干胞和血管的关系.pdf

摘 要 虽然神经系统和血管系统的功能不同，但他们在哺乳动物体内的走行高度一致，在 周围神经系统（Peripheral Nervous System，PNS），血管多和神经伴行，分枝分布于全身 各个器官和大多数组织；在中枢神经系统(Central Nervous System，CNS)，神经和血管 关系的研究最近越来越受重视。人们发现神经系统和循环系统在发育上也有许多协同 性，一些轴突引导分子，如成形素、生长因子、血管生成因子（ Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF) 等对神经系统和循环系统的发育有双重作用，所以，二者之一任何一个 发生异常都会导致如阿尔茨海默病( Alzheimer’s Diease，AD)[8]、肌萎缩性脊髓侧索 硬化症(Amyotrophic Lateral Sclerosis，ALS) 等神经退行性疾病[1,9]。对神经干细胞 (Neural Stem Cells，NSC)和血管之间发育的关系及其机制的研究有利于我们了解这些疾 病的发病原理，找到治疗对策，具有十分重要的意义。 目的：鉴于中枢神经系统内血管和脑脊液以及血脑屏障的关系密切，我们分三个方 向来研究 内神经干细胞和血管的关系， 出生后神经干细胞与普通脑血管的关系； CNS 1 脑脊液最集中区 侧脑室下区 ， 内的神经干细胞具体形态、 2 (Sub Ventricular Zone SVZ) 维持、分化和迁移情况； 神经干细胞和血脑屏障的关系。 3 方法：本课题应用免疫荧光、BrdU 和墨汁血管灌注等技术对生后小鼠大脑内神经 干细胞，神经前体细胞，神经胶质细胞和血管进行形态学观察。 结果：①P0 时小鼠大脑内几乎全部是Nestin 阳性的放射状胶质细胞；从P0 到P14， GFAP 阳性的星形胶质细胞从很少到越来越多，血管附近的Nestin 阳性放射状胶质细胞 最先向 GFAP 阳性星形胶质细胞分化，形态上也最先成熟；不和血管壁接触处，Nestin 和GFAP 共表达的胶质细胞多形成Nestin 包裹GFAP 的“环形”夹心或者“半环形”夹 心两种形状，而和血管壁紧贴处，易形成“半环形”夹心；血管壁对胶质细胞从放射状 胶质细胞分化为星形胶质细胞的过程中，血管壁首先起着促进分化作用，而后细胞自身 开始完成内部分化，这时血管壁又阻碍分化，维持未分化的作用。②P14 时，GFAP 阳 性的星形胶质细胞基本分化成熟，P30 时，分化完成；皮质表面的GFAP 阳性的星形胶 质细胞突起短而多，深层的突起长而少，有明显的不同，GFAP 阳性的星形胶质细胞在 这两个地方有两种形态存在。③出生后早期Nestin 阳性的放射状胶质细胞的长突起即基 突（发育早期有两个突起，基突和顶突，顶突位于神经管的内面，基突位于神经管的外 面），不仅仅和脑表面的软膜形成“球形”或“圆锥形”足状扣突，还广泛的伸向大脑 内的血管。④P14 时，Nestin 阳性的放射状胶质细胞的基突在部分皮质、纹状体的局部 血管壁周围这两处地方有阳性表达，形成的足状扣突多在血管的分支、分叉处；部分 Nestin 阳性的放射状胶质细胞的丝状长突起紧贴血管壁，和血管的走形一致，形成了“隧 道”样神经干细胞巢，保持了干细胞未分化状态。⑤P30SVZ 纹状体面部分Nestin 阳性 细胞同时表达DCX 阳性，可见Nestin 阳性的放射状胶质细胞不但能分化为神经前体细 胞，还作为支架引导神经前体细胞的迁移。⑥神经干细胞在侧脑室下区从出生后到成体 都多沿血管分布，血管无论新旧、性质和来源的不同，周围都会聚集神经干细胞。 ⑦P30SVZ 内的部分GFAP 阳性细胞和BrdU 共表达，有增殖功能，并有丝状绒毛样突起 深入侧脑室，和脑脊液相接触。⑧发育早期，血管壁上 Collagen4 阳性的区域，同时聚 集很多Nestin 强阳性的放射状胶质细胞基突的足状扣突。而血管外基膜结构还没有生成 的区域，则多数没有聚集Nestin 阳性的放射状胶质细胞基突的足状扣突。 结论：1，小鼠大脑血管参与神经干细胞分化为星形胶质细胞。2，小鼠大脑血管对 神经干细胞的维持和血管周围的结构有关，而和血管的来源，新旧，性质等物质交换因