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抑藻菌Alteomonas sp.DH46的发酵条件优化及固定化研究.pdf
摘要
摘要
有害赤潮已经成为当今全球性的海洋灾害,与沙尘暴并列为我国目前面临的、
由于人类活动而造成的两大自然灾害之一。赤潮的频繁爆发已使我国滨海地区生态
安全和沿海经济的可持续发展面临着极为严峻的挑战。近年研究表明,菌.藻关系在
种群演替和有害藻华动力学中起着重要作用,而诸多抑/杀藻细菌的发现为微生物防
治赤潮提供了可能的途径。
目前国内外抑/杀藻细菌及其活性物质的研究虽然取得了一些进展,但在实际的
工作中仍存在除藻效能不高、有效细菌浓度不高等缺陷,因此,通过优化发酵条件
和固定化技术,研发一种新型高效的生物除藻技术,以提高抑藻细菌的生物量和抑
藻效果显然具有重要的现实意义。本论文以实验室前期获得的高效抑藻菌
Alteromonas
sp.DH46为研究对象,通过优化培养条件和培养基组成的方法改善其培
养,提高细胞密度及抑藻效果,并通过固定化方式加强抑藻微生物制剂的效果。获
得的主要结果如下:
l、 以ZoBell2216E为基础培养基,采用单因素法探索优化培养条件,结合菌体生
长量(干重)和抑藻率,考察碳源、氮源、温度、初始pH值、转速、盐度等因素的
改变对抑藻菌生物量和产活性物质的影响。结果表明该菌的最佳培养条件为:初始
pH为7,盐度为30%0,温度为28C,转速为180r/min,培养时间24h。
2、通过均匀设计实验优化其培养基组分,考察了不同添加组分的影响,从中选择
重要影响因子进行均匀设计。即选择胰蛋白胨、可溶性淀粉、酵母粉、NaN03、MgS04
为重要影响因子,以菌体干重为评价指标,进行混合均匀设计,利用DPS软件对实
验值进行回归分析,建立回归模型。优化后的培养基组成为(g/L):胰蛋白胨14.0,酵
母粉1.63,淀粉5.0,NaN03 2.3。在最适培养条件下采用优化培养基进行
1.6,MgS04
培养,获得菌体干重和杀藻率分别为7.36g/L与98.4%,比优化前分别提高了107%
和10%。
3、采用海藻酸钠.微孔淀粉复合固定法固定化抑藻菌Alteromonassp.DH46。通过考
摘要
察包埋固定化抑藻菌的影响因素,优化了固定化细胞的的制备条件。当控制海藻酸
3.20士0.08
mm、机械强度良好的的凝胶微球。探讨了包埋固定化对抑藻菌DH46
生长特性的影响,并利用该复合载体固定化抑藻菌DH46进行抑藻测试,为其在工
业上的应用提供参考。
4、采用聚氨酯泡沫吸附法固定化培养Alteromonas
sp.DH46。通过分析抑藻菌DH46
在PUF载体中的固定化情况,菌体在载体中的分布,并结合电镜扫描结果,确定聚
氨酯泡沫与抑藻菌DH46生物相容,并能有效的吸附固定DH46菌细胞。通过考察
载体尺寸、添加量和接种量等因素对菌体固定化培养的影响,优化了聚氨酯泡沫固
投加2.09风干后的固定化载体48h后抑藻率可达86.1%。
关键词:抑/杀藻细菌;培养条件优化;固定化技术
2
Abstraot
Abstract
With ofwaterbodies the occurrenceof
world,the
increasingeutrophication throughout
harmful ledtoextensive andenvironmentalissues
algalblooms(HABs)hasecological
in
and economic a increaseshaveoccurredtheir
losses,and
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