海洋微生物微包技术的建立——单分散海藻酸钠微球的制备及其应用研究.pdfVIP

海洋微生物微包埋技术的建立——单分散海藻酸钠微球的 制备及其应用研究 中文摘要 lI 本文利用自制的微流装置，成功制备了粒径从45—175m的单分散海藻酸钠 微球，并对微球制备过程进行了优化。该装置制备的微球不但粒径均一，而且固 化过程简单易行。实验发现，流动相流速、分散相流速以及分散相浓度3-5％(w／v) 对微球粒径有着明显的影响。此外，微球的固化方式以及固化液的浓度对微球的 形态有着明显的影响。实验对海藻酸钠微球性质进行了研究，研究发现，微流法 制备的海藻酸钠微球适合应用于海洋微生物的包埋培养，并且通过荧光显微镜和 流式细胞仪可以检测微生物在海藻酸钠微球中的生长状况。 在微流法制备天然聚合物微球的方法中，微球的固化过程和制备过程都是分 开进行的，并且微球的形态很大程度上受到固化液的影响n～。本实验设计了一 种新的微流装置，制备了粒径均一的海藻酸钠微球。这种新装置依赖于共轴微流 装置Ⅲ，实现了固化过程和微球制备过程的同步进行，使单分散微球的形态更容 易控制。实验发现，当流动相流速小于60mL／h，分散相的流速小于0．2mL／h，海 藻酸钠浓度小于2％(w／v)时，均无法获得单分散性海藻酸钠微球。在微球的固 时，才能得到形态稳定，规则的球形微球。 研究海藻酸钠微球的性质发现，微球具有良好的机械稳定性，随着储存时间 的延长，微球保持完好的球形和光滑的表面形态；3％的海藻酸钠溶液制备的微球， 以牛血清白蛋白作为大分子物质的扩散模型，采用扩散介质溶液中蛋白浓度的变 化来表征大分子物质在海藻酸钠微球中的扩散行为，实验发现，海藻酸钠微球具 有良好的通透性；研究pH值对海藻酸钠微球稳定性及微球粒径大小的影响时发 现，当pH值小于4时，微球粒径明显开始变小；当pH值大于5时，微球粒径基 本不发生变化；当pH值大于7时，微球粒径明显变大，但是在不同pH值条件下， 微球都保持良好的球形，表面光滑，没有出现破损的状况。 本试验将制备的单分散海藻酸钠微球应用于海洋微生物的包埋培养，以哈维 氏弧菌SF-1为模式海洋菌，通过扫描电子显微镜、荧光电子显微镜以及流式细 胞仪对海洋微生物的包埋状况和生长状况进行研究，实验发现，经过包埋培养后 的海洋微生物，可以在微球能形成菌落，生长状况良好。 关键词：微流法；单分散；海藻酸钠微球；海洋微生物；流式细胞仪 Abstract Wchaveobtained from60_1 monodisperse ranged 80I_tm alginatemicrocapsules anewmicrofluidic hastheadded of lowcost using approach，which advantagesbeing and for a condition uniform—sized simplesolidifyprocess．Thepreparation producing was ambientflow flow microspheresoptimized．Theliquidrate，Sodium rate alginate and ofthe ondiamenterwerestudied． viscosityaiginatesolution(3～5wt．％)effects Wehavedemonstratedthatthesizeof incre