溴氰菊酯抗性品和敏感品系小菜蛾成虫蛋白质组的比较与分析.pdfVIP

摘要 摘要 小菜蛾Plutella xylostella(L．)属鳞翅目菜蛾科，是十字花科蔬菜的主要害虫 之一。由于在生产上用药频繁，加之小菜蛾生活史的特殊性，它对多种杀虫剂 都产生了抗药性，己成为世界上最难防治的害虫之一。因此，为了找出抗药性 相关的蛋白并阐明抗药性机理，本实验采用了比较蛋白质组学的方法研究了溴 氰菊酯抗性品系和敏感品系小菜蛾成虫在蛋白水平上面的表达差异。 在本实验中，通过双向凝胶电泳，每块凝胶上得至U600个左右的蛋白点，其 中溴氰菊酯抗性品系和敏感品系小菜蛾成虫之间有23个蛋白点存在表达差异，将 这些差异蛋白进行串联质谱鉴定，有8个蛋白鉴定成功。相对于敏感品系来说， 在抗性品系中有5个蛋白表达量上升，3个蛋白表达量下降，鉴定成功的蛋白包括 成虫盘因子，丙酮酸脱氢酶E1 B亚基，凝血酶抑制剂前体，化学感应蛋圭tCSP2， Cu／Zn超氧化物歧化酶(SODl)，类过氧化氢酶等，这些蛋白涉及到生长因子， 对双向电泳和质谱鉴定出来的差异蛋白点Cu／Zn超氧化物歧化酶(SODl)进行了 验证，结果跟双向电泳中的结果是一致的；利用双向电泳筛选出来的具有差异表 达的某些候选蛋白，利用荧光定量的试验方法研究了基因在RNA表达水平上的 变化：对5个基因进行了相关的研究，相对于敏感品系来说，在小菜蛾抗溴氰菊 虫盘因子表达水平上调，糜蛋白酶和凝血酶抑制剂在表达水平上没有显著差异； 在RNA和蛋白表达水平上来看，Cu／Zn超氧化物歧化酶(SODl)和化学感应蛋白 CSP2基因在RNA上的表达水平和蛋白表达水平是一致的，成虫盘因子是相反的， 糜蛋白酶和凝血酶在RNA水平上面没什么差异，但是在蛋白水平上面有明显的表 达差异。 由于本研究使用的抗性品系是在敏感品系的基础上通过多代的药剂选择培 养而成的，因此这些差异表达的蛋白可能在昆虫的抗药性过程中起到一定的作 用。所以，本实验有助于加深对昆虫抗药性机理的认识，有助于制定新的策略 去预防减少抗性的进一步发展。 关键词：小菜蛾，蛋白质组，抗药性，溴氰菊酯 Abstract Abstract Thediamondback becomeoneofthemost moth，Pluttela xylostella皿．)has destructiveofcmciferousallovertheworldwhose insecticide pestS crops high resistancehasreceivedmuchattentiontodate．Soitis to the importantclarify mechanismofinsecticideresistance．Inorderto all intotheinsecticide gainnight resistanceat level，we to protein employedcomparativeproteomicsapproach the differences investigate betweendeltamethrin-resistantstrainand proteomic deltamethrin—sensitiveand adultdiamondbackmoth． strain(DRDS)of Inthis numberof