粟酒裂殖酵母核体蛋白RPL32表达水平下降引发的无性絮凝作用及与有性絮凝作用的比较研究.pdf

摘要 摘 要 我们实验室之前报道过粟酒裂殖酵母核糖体蛋白RPL32-2具有潜在的转录 因子活性。在进一步研究RPL32—2功能时，发现RPL32蛋白基因敲除突变体 基因的酵母菌株也发生细胞凝絮作用，但是随机敲除非核糖体蛋白一甘露糖磷酸 化甲脒基转移酶的编码基因mpg、2,6．二磷酸果糖二位磷酸酶的编码基因fbp的 酵母菌株却没有发生细胞凝絮作用。 35．9％和46．9％，合成的核糖体总量较野生型菌株的细胞分别下降了35．2％和 在非诱导培养基YEPD中未形成有性絮凝的单倍体细胞混合物相比，RPL32蛋 白的表达水平在有性絮凝细胞中也下降了42．1％。 转录组学分析表明，有性絮凝细胞中，很多核糖体蛋白基因和核糖体合成蛋 白基因表达水平下降，而核糖体合成抑制因子的基因表达水平上升，提示核糖体 蛋白下降确实是有性絮凝作用发生的一个特征。另外无性絮凝细胞和有性絮凝细 胞中都使用了因营养缺乏启动有性生殖过程的相关信号转导途径的一些调控因 子，并上调细胞壁絮凝素基因的表达。因而我们提出，缺碳或氮饥饿的作用，就 在于启动了核糖体蛋白合成的降低，当核糖体蛋白下降到一定阈值后，就会启动 絮凝素的合成途径，导致细胞发生黏附作用，进行有性交配，形成子囊孢子，以 渡过不良环境。 关键词：粟酒裂殖酵母，核糖体蛋白RPL32，细胞絮凝，有性生殖，分子机制 Abstract Wehave thattheribosomalRPL32—2actedasa reported protein potential activatorinthefission transcriptional yeastSchizosaccharomyces pombe．To determinetheextrafunctionsof RPL32 RPL32，wedisrupted bydeleting expression itscoded or inthe foundthatwhen gene rpl32—2rpl32—1 genomeof＆pombe．We culturedinnutrientrichmedium ofthe and YEPD，both Acells cells rpl32一I rpl32—2A wereflocculated．Buttheflocculationwas supressedbyexgenousexpressing RPL32—1inthe cellsor RPL32—2inthe cells．Withthe rpl32—1A expressing rpl32—2A sanle deleted chosenribosomalRPL9—2andRPL21—2 method，werandomly protein coded and flocculationwerefoundedinallthese genesrpl9—2rpl2I一2，The properties mutantstrains．Butwhenwenext the of chosen