产灵菌红素粘质雷氏菌发酵条件优化及色素性质的研究.pdfVIP

for DissertationMaster of DegreeZhejiang NormalUnivers ity STUDIESONFERⅣ匝N1’ATIONOPTIMIZATl0NAND OFPRODIGIOSINS PIGMENTS’QUALITIES sERRATIAMARCESCENs Candidate：Weifeng 一 ‘ T● ● l langdongnua Supervisor：J Discipline：Botany of Sciences， ChemistryLife College Normal 321004，Zhejian ZhejiangUniversity,Jinhua 产灵菌红素粘质沙雷氏菌发酵条件优化及色素性质的研究 摘要 微生物天然色素中许多色素被发现不仅具有基本的着色功能，亦具有一定的生理活 性从而被认为是功能性色素。灵菌红素是一类天然红色素的总称，骨架特征为含有三个 共轭吡咯环，是由微生物产生的次级代谢产物。作为一类功能性色素，随着研究的深入， 它的许多生物学活性被陆续发现，包括抗细菌、抗疟疾、抗真菌和抗原生动物等。但最 令人们感兴趣的是其所具有的免疫抑制活性和引起肿瘤细胞凋亡作用。 本文从自然界中筛选具有产色素菌株，将其中一株鉴定为粘质沙雷氏菌，命名 Sm．128，该菌株产含有灵菌红素的红色色素。通过培养条件、培养基组分优化，提高灵 菌红素产量；通过提取条件优化提高灵菌红素的提取效率，从而最大化色素产量；最后 对实验中获得的色素进行分离分析，判断各自结构、产量等。 (1)通过从自然界不同生境中筛选产色素菌株，经分离、纯化共获得16株产色素 菌株。其中Sm．128菌株在通过传统及分子手段最终鉴定该菌为粘质沙雷氏菌。该菌16S NO．M2010347。 菌种保藏号为CCTCC (2)为提高Sm．128菌株灵菌红素的产量，对发酵培养基及发酵条件进行优化。在预 实验后挑选甘油含量、蛋白胨含量、初始pH三个因素设计响应面优化实验，最终确定最 8．8，色素产量是出发培养基的13倍， 佳发酵培养基为甘油0．93％，蛋白胨1．4％，初始pH 实现了该菌产灵菌红素液体发酵的有效优化。 (3)灵菌红素作为胞内产物，需要将菌体破碎方可获得色素，在比较多种菌体破碎 方法及提取条件后，得出以下结论：在摇瓶发酵条件下由于菌体的量少，采取研磨结合 有机溶剂破壁法，以pH2的60％的乙醇作为提取剂提取灵菌红素。在利用小型发酵罐 获得较多菌体时，采用高速匀浆破碎机直接对发酵液进行破碎后用乙酸乙酯进行萃取获 得色素粗提物。 (4)作为天然色素，其显色性质以及稳定性是研究的基础。Sm一128所产色素添加 果一般，Cu、Ca对色素有明显的减色效应；对日光及紫外光敏感：对温度不敏感；对 氧化剂不敏感，对高浓度还原剂敏感。 3-59／L；b2组分为含有苯环结构的色素，但是分子结构尚未研究出。 关键词：粘质沙雷氏菌；灵菌红素；筛选；分离； RSM；稳定性 STUDIESON FEI之Ⅳ匝N1、ATION OPTIMIZATIONAND OF PRODIGl0SINS PIGMENTS’QUALITIES ABSTRACT Natural from not