下丘脑室旁核—体—甲状腺胃动素的表达、调控及对胃运动的影响研究.pdfVIP

中文摘要 目的s 观察胃动素(MTL)在下丘脑室旁核(PvN)、垂体及甲状腺的表达，比较甲状腺 恶性肿瘤组织中表达的差异及临床意义； 探讨下丘脑PVN．垂体．甲状腺对甲状腺胃动素分泌及胃运动的调控，以及甲状腺 胃动素对下丘脑PVN、垂体MTL表达的反馈调控； 胞增殖、侵袭和转移中的作用和临床意义。 方法： 1．采用荧光免疫组化技术，观察下丘脑PVN、垂体及甲状腺内MTL的定位和定性表 PCR)、Southern 达；采用实时荧光定量PCR(Real．time Blot和分子克隆、荧光免 疫组化双染等技术，观察人甲状腺和小肠MTL前体mRNA基因序列异同；比较 MTL前体mRNA和蛋白在正常甲状腺和甲状腺良、恶性肿瘤组织中表达的异同。 2．采用在体胃运动和放射免疫方法，观察刺激／损毁下丘脑PVN、摘除垂体或甲状腺 腺素(T4)和MTL含量的改变；采用Real-timePCR法，观察电刺激／损毁下丘脑 PVN及摘除甲状腺对下丘脑．垂体．甲状腺MTL前体mRNA表达的影响；采用免疫 组化法，观察刺激／损毁下丘脑PVN对甲状腺MTL表达的改变，及甲状腺摘除对 PVN内c．Fos表达的影响。 3．采用Southemblot、Westernblot和荧光免疫细胞化学技术检测Tr细胞内MTL mRNA和蛋白表达，应用Small 实验和划痕实验分析MTL基因表达对TT细胞增殖、侵袭和转移能力的影响。 结果： 1．大鼠下丘脑PVN、垂体、甲状腺及人垂体、甲状腺组织均可见MTL免疫阳性细胞 的表达，且在甲状腺MTL与降钙素(CT)共表达于同一细胞，即甲状腺C细胞。 因序列(旦gll2三l垒，NCBI，美国)相同。 3．正常人甲状腺和甲状腺肿瘤组织内均有MTL和MTL前体mRNA的表达，其中甲 状腺髓样癌MTL及其前体mRNA的表达显著高于正常甲状腺、甲状腺乳头状癌、 滤泡癌、嗜酸性腺瘤及结节性甲状腺肿(Po．01)；而甲状腺乳头状癌和滤泡癌MTL 及其前体mRNA的表达明显低于正常甲状腺、嗜酸性腺瘤及结节性甲状腺肿 (PO．05)；结节性甲状腺肿和嗜酸性腺瘤与正常甲状腺相比，MTL及其前体 mRNA的表达无显著差异(P0．05)。 4．下丘脑PVN对胃动素分泌及胃运动的影响结果显示，电刺激下丘脑PVN可使大鼠 显著增加(Po．05)，胃窦MMCHI期样收缩明显增强(P0．05)，该作用可部分被 状腺摘除假手术组相比，其血浆MTL含量显著降低(Po．05)，胃窦MMCIII期 MMC III期样收缩明显减弱(Po．05)。 III期收缩频率显著减 5．垂体对胃运动的影响研究结果显示，在垂体摘除大鼠，MMC III期收缩频率显著降低(P0．05)。 6． 甲状腺对胃动素的分泌、胃运动的影响以及对下丘脑PVN、垂体MTL表达的反馈 调控研究显示，甲状腺摘除后，大鼠血浆MTL含量显著减少(2d，P0．01；4d， P0．05)，下丘脑和垂体MTL HI (2h，P0．05)。 7．TT细胞MTL的表达、分泌和调控研究显示，TT细胞内有大量MTL免疫阳性物 ‘ 细胞的增殖、侵袭和转移(P0．05)。 结论： 1． 2．人甲状腺和人小肠MTL前体mRNA基因序列相同。 3．MTL及其前体mRNA在甲状腺髓样癌呈高表达，而在甲状腺乳头状癌和滤泡癌呈 低表达。 4．MTL参与下丘脑PVN．垂体．甲状腺胃运动的调控，甲状腺可反馈影响下丘脑、垂 体MTL的表达。 袭和转移能力。 博士研究生：郭菲菲(生理学) 指导教师：徐珞 关键词：胃动素；下丘脑；垂体；甲状腺；胃运动 onGastric The andEffec