克隆猪印迹基因达及其甲基化状态研究.pdf

本研究由以下项目资助： “国家自然科学基金面上项目”(项目编号 NationalNaturalScienceFoundation ect Proj (No National863 ofChina project (No．2008从101006) I 一 ， 目 录 目 录 中文摘要……………………………………………………………．I 英文摘要……………………………………………………………．I 1前言………………………………………………………………l 1．1基因印迹的研究进展………………………………………………1 1．1．1基因印迹的发现………………………………………………1 1．1．2印迹基因的基本特征…………………………………………．．2 1．1．3基因印迹的分子机制…………………………………………．．6 l-1．4基因印迹相关的疾病…………………………………………．．7 1．2猪的体细胞核移植的研究进展………………………………………．8 1．2．1体细胞核移植研究的现状………………………………………．8 1．2．2猪的体细胞核移植的效率………………………………………．9 1．2．3猪的体细胞核移植主要环节及影响因素……………………………10 1．2．4猪的体细胞核移植的应用价值…………………………………．．14 1．3基因印迹与克隆动物发育…………………………………………．16 1．3．1体细胞核移植过程中表观遗传学的变化……………………………16 1．3．2克隆动物发育异常与印迹的相关性………………………………．19 1．3．3基因印迹在克隆动物中建立和维持的可能机制………………………20 1．4本课题拟研究印迹基因的研究现状…………………………………．．22 1．4．1 IGF2基因…………………………………………………．22 1．4．2 H19基因…………………………………………………．．24 1．4．3 PEG3基因…………………………………………………．24 1．4．4 GRBl0基因…………………………………………………25 1．4．5IGF2和H19基因的印迹机制……………………………………26 1．5本研究的目的和意义……………………………………………．．27 2材料与方法………………………………………………………．．29 2．1实验材料………………………………………………………29 2．1．1实验动物…………………………………………………．．29 2．1．2主要仪器与设备……………………………………………．．29 一‘ 2．1．3主要试剂及试剂盒……………………………………………29 ， 2．1．4常用试剂及配制……………………………………………．．30