山羊zfp36因的克隆、表达及组织表达谱研究.pdfVIP

IIIIIIIIIIII 1111IIIIIIIlUI 3 Y214391 摘要 锌指蛋白基因zfp36是一类具有手指状结构域的转录因子，在基因表达调控、细 胞分化、胚胎发育、增强植物抗逆性等方面具有重要的作用，该基因在小鼠和人与关 节炎、自身免疫疾病、骨质增生等综合症相关。但是目前有关山羊zfp36基因的研究 未见报道。对山羊zfp36基因进行结构分析、探讨其变异情况及种群特异性，研究该 基因的组织表达差异，可为今后进一步开展该基因功能研究奠定基础。 基酸；同源比对发现山羊zfp36基因与人类、猪、牛、绵羊和大鼠的核苷酸序列一致 性分别达到86％、89％、98％、99％、82％。以济宁青山羊、雷州黑山羊、南江黄羊、 辽宁绒山羊为研究对象，运用PCR．SSCP方法检测其品种问多态性，并探讨不同基因 型在品种间的分布规律；结果显示在外显子未发现SNPs，在内含子上检测到了一个 SNPs位点，为A／T碱基置换，群体遗传学分析表明其突变频率分布具有品种特异性。 化，利用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测出成功表达的山羊ZFP36蛋白。运用实时定量 的表达情况，结果显示，zfp36基因在检测的8个组织中均有表达，但相对表达量存 在显著差异，在肾和肝组织中表达量最高，在脑和心脏中表达量较低。 结果表明，z加36基因的结构和功能在物种间相对保守，特别是在山羊的外显子 区域，群体遗传学表明，其突变频率分布具有品种特异性。成功表达出的目的蛋白约 为33KD，与预测结果一致，并且以可溶形式存在。组织表达谱分析表明，z审36基 因在肾和肝组织中表达量最高，在脑和心脏中表达量较低，存在一定的组织特异性。 关键词：山羊；克隆；原核表达；PCR．SSCP；多态性；组织表达谱 and of in Cloning，ExpressionExpressionpatternzfp36genegoat Anxue Postgraduate：Feng Major：Genetics Direction：AnimalGenetics Supervisor：．JiaQing Abstract Zinc 6wasa factorwith stmcture fingerproteingenez．勿3 transcriptionfingershape an rolein domain，which playedimportantregulatinggeneexpression，cell was ofthe embryonic resistanceetc．It relatedtothe development，enhanceplant syndrome in therewereno arthritis，autoimmune humanandmice．While disease，hyperosteogeny about