洞庭湖水域不同性野生鲫鱼生物学特性及进化关系研究.pdf

中文摘要 在物种进化过程中，多倍化在进化中的作用得到人们越来越多的 重视。在脊椎动物中，鱼类的多倍化现象最为普遍。鲫鱼更是被认为 auratus 是古老的四倍体鱼。鲫鱼(CarassiusL．)由于其适应能力、 繁殖能力和抗病能力极强，分布很广，且在洞庭湖水域具有丰富的资 源。我国的野生鲫鱼在很长时间内一直被认为是二倍体(2n=100)。 但白二十世纪80年代以来，中国各省的野生鲫鱼中陆续报道有三倍 体的存在。本研究以洞庭湖水域的野生鲫鱼为研究对象，对其倍性进 行了大规模的检测，发现其中有二倍体、三倍体和四倍体三种不同倍 性的野生鲫鱼存在，并对这三种倍性野生鲫鱼的多种生物学特性进行 了比较研究，探讨它们可能的多倍化起源和进化方式。主要内容如下： 1．通过DNA含量检测及染色体制片方法，从2005年起系统地 检测了洞庭湖水域的野生鲫鱼的倍性及其倍性组成。检测结果表明： 在洞庭湖水域的野生鲫鱼群体中，除了存在染色体数目为2n=100的 二倍体野生鲫鱼外，还存在染色体数目为3n=150+的三倍体野生鲫鱼 及少量染色体数目为4n=200的四倍体野生鲫鱼。三倍体野生鲫鱼的 数量在群体中占大多数，并且比例有逐年上升的趋势；而四倍体野生 鲫鱼在群体中的数量极少，并且只发现了雌性个体。其中，在中国野 生鲫鱼群体中存在四倍体尚属首次报道。三种不同倍性的野生鲫鱼在 洞庭湖水域中同时发现，对探讨鲫鱼多倍化和在染色体水平的遗传多 样性具有重要意义。 2．对洞庭湖水域三种不同倍性野生鲫鱼的外型及血细胞进行了 比较研究，结果表明：洞庭湖水域野生鲫鱼在外型上与已报道各地三 倍体鲫鱼有较大区别，但三种不同倍性野生鲫鱼彼此间在外型上并没 有明显区别；三种不同倍性野生鲫鱼血细胞大小与倍性成正比，且能 在三倍体和四倍体野生鲫鱼血细胞中观察到一定数量的无丝分裂的 现象。 3．使用了组织学切片、扫描电子显微镜和透射电子显微镜，对 洞庭湖水域三种不同倍性野生鲫鱼性腺进行了系统的比较研究。卵巢 组织学切片结果表明：三种不同倍性野生鲫鱼的卵巢都有正常的结 构，能产生正常的卵子。用扫描电子显微镜观察二倍体野生鲫鱼和三 倍体野生鲫鱼成熟精子结果表明：二倍体和三倍体野生鲫鱼精子都具 有正常的头部和尾部，但头部大小随倍性增加而增大。透射电子显微 镜观察二倍体和三倍体野生鲫鱼精巢结果表明：二倍体和三倍体野生 鲫鱼精巢结构基本相似，但三倍体野生鲫鱼精子头部，观察到一定数 量的空泡存在。对三种不同倍性野生鲫鱼的性腺研究表明：洞庭湖水 域野生鲫鱼性腺发育均正常，能够形成正常的精子和卵子。以上结果 为证明三倍体野生鲫鱼可育提供了直接的细胞学证据。 4．使用一系列与鲫鱼亲缘关系远近不同的雄鱼(二倍体野生鲫 鱼、三倍体野生鲫鱼、鲤鱼、团头鲂及紫外灭活的团头鲂精子)与三 种不同倍性野生鲫鱼雌鱼进行繁殖实验，比较研究三种不同倍性野生 鲫鱼的生殖方式，结果表明：三种不同倍性的野生鲫鱼有其各自不同 的生殖方式。其中，二倍体野生鲫鱼行正常的两性生殖；四倍体野生 鲫鱼只有雌性，但通过行天然雌核发育的生殖方式产生全雌后代来繁 衍；而三倍体野生鲫鱼为中间类型，如遇同源的三倍体野生鲫鱼精子 受精则行两性生殖的生殖方式，产生雌雄两种性别的后代。如遇亲缘 关系较近的异源精子激活则行天然雌核发育生殖，产生全雌的后代。 这个结果极大的丰富了我们对鲫鱼生殖方式的认识，该结果对今后野 II 生鲫鱼的繁殖育种工作具有重要的指导意义。 5．线粒体基因组具有完全母性遗传的特点，对三种野生鲫鱼的 线粒体全序列测序并比较，结果表明：三种野生鲫鱼具有很近的亲缘 关系，彼此间的遗传距离小于与红鲫的遗传距离，分化的时间很短。 而通过Sox基因HMG框分子标记检测不同倍性野生鲫鱼，比较了它们 的基因组在分子水平的差别，发现在三倍体野生鲫鱼与四倍体野生鲫 鱼中存在异源片段。同时，使用只有在鲫属鱼类中才能扩增出的 支，而三倍体和四倍体野生鲫鱼聚为一支。这两个分子生物学的证据 表明：不同倍性的野生鲫鱼起源于同一母系，但其中三倍体和四倍体 野生鲫鱼很可能不是二倍体野生鲫鱼直接加倍得到，而是通过二倍体 野生鲫鱼与近缘种通过杂交得到。这从分子生物学水平说明高倍性野 生鲫鱼的起源与进化，并探讨了使野生鲫鱼出现染色体加倍的可能原 因。上述结论为探讨杂交在物种进化中起