神经干细胞与脑瘤干细胞比较蛋白质组研究.pdfVIP

中文摘要 干细胞是一类既能自我更新又具有分化能力，并能在自我更新和 分化间保持相对平衡的细胞。近年来，许多研究者在脑胶质瘤中发现 一种与神经干细胞fNSC)相类似的细胞，从而提出了脑肿瘤干细胞 (BTSC)的概念，并认为它们是肿瘤发生和发展的细胞来源。BTSC的 发现，将对胶质瘤致病机理和治疗等方面的探索带来深远的影响。关 于BTSC，以下是共同关注的问题，将是进一步研究的重点：①由于 特异性表面标记是进一步研究BTSC的基础。②关于胶质瘤的发生和 发展，假说认为BTSC是细胞来源，由于自我更新和分化的异常，导 致肿瘤细胞不断增多。因此，调节BTSC向普通肿瘤细胞分化的机理 将是研究重点内容之一。本研究应用蛋白质组学方法，主要是双向凝 干细胞进行比较研究，寻找BTSC特异性标记，探究BTSC分化的相 关机理，为胶质瘤起源、诊断与治疗等提供新思路。本研究基于胶和 非胶路线对神经干细胞和脑肿瘤干细胞进行蛋白质组分析，第一次全 面准确地提供了神经干细胞和脑肿瘤干细胞的差异蛋白文库。基于胶 的路线法采用的是双向凝胶电泳技术，该技术凭借其高通量、较高灵 敏度、较高分辨率和一定的重复性，以及与质谱分析兼容性好的优点， 是目前最常用的蛋白质分离技术。同时，本研究采用非胶路线即同位 素标记相对和绝对定量法(iTRAQ)结合串联四极杆飞行时间质谱仪 I (QS吖岷XL)方法完善和验证双向凝胶电泳所鉴定到的差异蛋白。 iTRAQ．MS／MS的一个显著优点是可以同时获得四种样品中多肽身份 和相对丰度的信息，从而大大地提高了分析的可信度。在双向凝胶电 泳结合同位素标记相对和绝对定量法一共鉴定到244个差异表达蛋 白，其中双向凝胶电泳鉴定到了116个差异蛋白，同位素标记相对和 绝对定量法鉴定到190个差异蛋白，在这两种方法中都鉴定到的差异 蛋白有62种。这些差异蛋白主要参与体内的蛋白合成、蛋白连接、 转录调控等过程。 关键词：脑肿瘤干细胞；神经干细胞；双向凝胶电泳；同位素标记相 对和绝对定量；基质辅助飞行时间质谱；四级杆飞行时间质谱 II ABSTRACT Stemcellsaredefinedascellsthathavethe to abilityperpetuate themselvesselfrenewalandto maturecellsofa through generate tissue differentiation．Allstemcellsmustself-renew particularthrough the betweenself-renewalanddifferentiation． and relativebalance regulate describedthe ofacancerstem have existence Recently，severalgroups cell inhuman raisesfundamentalissues population gliomas，which theiractual todrivecancer andrecurrence．The concering ability growth BTSC thatnotallthecellsin havethesame hypothesissuggests gliomas to andmaintainthe ofthe