灰葡萄孢分生孢产生基因BC1G_12707.1的克隆及功能分析.pdfVIP

摘要 通过筛选灰葡萄孢ATMT突变体库，获得一株不能产生分生孢子的突变菌株 BCt78，采用PCR和Southern 基因组数据库中的已知基因序列进行BLAST分析，推测出了T-DNA的插入基因； 突变菌株的菌落形态、生长速度、胞壁降解酶活力、粗毒素的生物活性、对番茄叶片 的致病能力及部分致病相关基因的表达情况进行了研究。研究结果为进一步研究灰葡 萄孢分生孢子产生及致病机理奠定了基础。 1．TAIL．PCR结果证实T-DNA插入到灰葡萄孢BClG12707．J基因的起始密码子 12707．1，该基因DNA全长为135 处；RT-PCR结果证实突变基因为BClG bp，编码 1个由44个氨基酸所组成的假定蛋白(hypothetical protein)。 2．突变菌株在PDA培养基上菌落呈灰白色、生长速度减慢、不能产生分生孢予 及菌核；对番茄叶片的致病性增强，且胞壁降解酶PG、PMG活性显著增强。突变菌 株中参与细胞壁降解的角质酶基因cutA、多聚半乳糖醛酸内切酶基因Bcpgl；信号转 synthase)、 漆酶基因Lacl；跨膜蛋白基因B舻J『表达增强。 3．BClG 12707．1基因在灰葡萄菌株的产孢、产菌核及其致病力等方面起到重要 的作用。 关键词：灰葡萄孢；分生孢子产生；T-DNA插入突变体；致病性； toconidial in of related production andfunctional BClG_12707．1 Cloning studygene cinlerea Botrytis Xuan AuthorWang Jian-min Supervisors：Prof．Han Prof．DongJin—gao Biology Major：Developmental Abstract WaSfound the mutantBCt78without ofconidiation byscreening Anovel ability PCRandSouthern cinereaandtestified techniques． transformantsof by Bloting Botryt／s insertionsitewas TAIL-PCR and The ofT-DNA acquiredby technology flankingseque