灵芝硒多糖对乳癌MCF-7细胞蛋白质组的影响.pdfVIP

灵芝硒多糖对乳腺癌McF-7细胞蛋白质组的影响 摘要： 硒是生命活动的必需元素，在人类防癌抗癌、延缓衰老、提高机体免疫力、预 防和治疗心血管疾病和克山病等方面都发挥着重要作用。硒的存在形式有无机硒和有机 硒两种，其中有机硒毒性低、副作用小，能够更好地发挥硒的生理活性。有机硒主要包 括硒多糖、硒氨基酸、硒蛋白和硒核酸等，其中硒多糖不但具有无机硒的多种活性，还 具有多糖的各种生理功能，且硒多糖的活性普遍高于硒和多糖。某些食用菌能将硒从环 境中的无机形式转化为体内有机形式，而灵芝的硒转化率又为食用菌之冠。研究证实灵 芝硒多糖是一种具有广谱的免疫促进剂，具有防癌抗癌、调节免疫功能、延缓衰老、抗 感染、抗辐射等生理作用。 目前对硒多糖的抗肿瘤作用机制的研究，大多是从对单个蛋白作用影响或某条作用 途径的角度进行研究，然而这种方式无法满足后基因组时代的要求。因为硒多糖对肿瘤 细胞的作用往往是多方面、多途径的，涉及到多种蛋白质的表达；而且多种蛋白质的参 与是交织成网络的，或平行发生，或呈级联因果；同时，硒多糖在执行生理功能时蛋白 质的表现是多样的、动态的，并不象基因组那样基本固定不变。因此要对硒多糖的抗肿 瘤作用机制有全面和深入的认识，必然要在整体、动态、网络的水平上对蛋白质进行研 究。 本实验首先对灵芝菌丝进行加硒发酵培养，然后提取其中的硒多糖，并将其作用于 24h 小时后，细胞开始出现凋亡，凋亡抑制率达N25．89％。延长作用至724,时，最高抑制率 硒多糖处理的MCF．7细胞，在培养48h后表达的蛋白与对照组细胞的蛋白有明显区别。 利用PDQuest软件分析，取5个差异较大的蛋白质，切点后胶内酶切的方法对这5个蛋白 点进行MALDI-TOFMS／MS串联质谱分析。结果显示这5个蛋白分别是膜连蛋白Annexin Shock 90和酪 A2、角蛋白Keratin 3、热休克蛋白Heat 8、原肌球蛋EITropomyosin protein 氨酸3单加氧／色氨酸5单加氧酶激活蛋白Tyrosine3／tryptophan activative protein，资料显示这5个蛋白对肿瘤的发生、发展都有着重要的作用和影响， 从蛋白质组学的角度探讨了灵芝硒多糖发挥其抗癌活性后引起MCF．7细胞中哪些蛋白 发生了变化，从而解释灵芝硒多糖的抗癌、抑癌的真正机理，为抗癌药物的研发提供理 论依据。 关键词：灵芝硒多糖：MCF．7细胞；双向电泳；质谱分析 灵芝硒多糖对乳腺癌细胞MCF．7蛋白表达的影响的研究 Abstract：Seleniumisallessentialtraceelementforhuman aswellas all beings plays effecton andtreatmentof important anti—cancer，anti—aging，improvingimmunity,prevention diseaseandKeshandisease．Thereisconsensusthat Sehas cardiovascular organic higher andlower than isconsideredtobesafer． bioavailabilitytoxicityinorganicspecies，and seleniumincludes andSO Organic Se-containingpolysaccharides，Se—containingproteins on，