迟缓爱德华氏菌唾液酸酶克隆表达与功能和研究.pdf

摘要 迟缓爱德华氏菌唾液酸酶的克隆表达与功能研究 摘要 细菌的唾液酸酶是一类糖苷水解酶，在细菌对宿主细胞和组织的侵染过程中发挥着重 要作用。本研究中，我们采用牙鲆为动物模型，初步探索迟缓爱德华氏菌唾液酸酶NanA 的功能。生物信息学分析表明，NanA由670个氨基酸组成，含有唾液酸酶结构域和自体 box，1个PPmotif和保守的 运输结构域，前者包含了细菌唾液酸酶的典型结构：5个Asp 催化中心。我们对其唾液酸酶结构域进行了体外重组表达，纯化得到的重组蛋白rNanA具 有水解唾液酸底物的水解酶活性。为了进一步检测NanA的功能，我们构建了nard的突 牙鲆组织的感染能力大幅下降，抵抗牙鲆巨噬细胞活性氧的杀伤能力以及在巨噬细胞中的 生存复制能力都明显降低。以rNanA作为亚单位疫苗，能够有效的保护牙鲆抵抗迟缓爱德 华氏菌的感染。综上所述，NanA是一种毒力相关因子，在迟缓爱德华氏菌的致病过程中 发挥了重要作用。 关键词：唾液酸酶；迟缓爱德华氏菌；毒力；疫苗