外源性精氨酸保护肝损伤作用与机制和研究.pdfVIP

外源性精氨酸保护肝损伤作用 及其机制的研究 研究生： 温秀平 导师： 赵龙风教授 赵和平教授 摘要 目的：通过研究急性肝损伤时外源性精氨酸对肝组织一氧化氮合 酶表达和肝脏血液流变学的影响，探讨外源性精氨酸保护肝损伤的作 用及其机制。 方法：以皮下注射硫代乙酰胺(TAA)的方法复制急性肝损伤动 物模型。将Wistar大鼠30只随机分为四组：正常对照组(N组)；精 予L—ar9100mg／kg灌胃，其他组则给予等量生理盐水灌胃；实验第四 盐水皮下注射作对照，第二次注射TAA48h后，用1％戊巴比妥钠 0．33ml／1009腹腔内注射麻醉，在无菌条件下腹主动脉采血，检测丙氨 含量，判定肝功能情况；测定全血粘度和最大血小板聚集率，观察血 液流变学变化；同时检测肝组织匀浆中一氧化氮(NO)、丙二醛 染色显示肝脏组织形态学改变，Weigert氏特殊染色显示肝脏血管内的 微皿栓，SABC免疫组化法检测内皮型一氧化氮合酶(Endothelialnitric oxide synthase，eNOS)和诱生型一氧化氮合酶(Induciblenitricoxide synthase，iNOS)在肝组织中的表达，用图像分析仪做半定量分析。 结果： 全血黏度和最大血小板聚集率也明显降低(p0．05)；L．arg组与 明显升高(p0．05)，全血粘度和最大血小板聚集率也明显降低 全血粘度和最大血小板聚集率均明显下降(p0．05)，说明肝功能和微 循环均得到明显改善。 2、HE染色显示：L．arg组无炎性细胞浸润和坏死，血管扩张较 明显；L—arg+TAA组炎性细胞浸润比较明显，但与TAA组相比，前 组明显减少；TAA组可见肝细胞肿胀，肝窦变窄，大量的炎性细胞浸 润，有点片状坏死和桥接坏死。 也明显降低(p0．05)。 4、免疫组化显示：L．arg组肝组织eNOS表达呈强阳性， L—arg+TAA组呈弱阳性，两组染色的平均扶度值比较有统计学意义 iNOS表达呈痕迹反应，两组染色的·F均灰度值比较有显最著性差异 (p0．05)，且iNOS主要在中央静脉周围的肝细胞与枯否细胞胞浆rfI 表达，N组和L—arg组无iNOS表达。 结论：急性肝损伤伴有严重的微循环障碍，给予外源性精氨酸后 使eNOS表达上调，外源性精氨酸在该酶作用下生成的NO可抑制血 小板聚集、阻止血栓形成同时抗凝能力增强，从而使全血粘度和血小 板聚集率显著降低，肝脏微血栓形成减少，肝脏的微循环障碍得到改 善，同时给予外源性精氨酸后，随着SOD的增加，减轻了脂质过氧 化反应，保护了肝细胞，对急性肝损伤起到保护作用：而皮下注射 T从，使内毒素水平增高导致肝微循环障碍，同时内毒素诱导iNOS 表达上调，在iNOS催化下生成的NO增多，加重了肝损伤。 关键词：精氨酸 肝损伤 内皮型一氧化氮合酶 诱生 型～氧化氮合酶 微循环 血液流变学 兰!!兰查竺 !主!苎竺苎!!塑 the Studieson Protective Roleand Pathogenesis of inLiver Rats exogenousL-arginine Injury Wen Xiu Postgraduate： Ping Tutor：ProfessorZhao Long