巨噬细胞吞噬现象实验观察.docVIP

巨噬细胞吞噬现象的实验观察 一．实验目的： 观察巨噬细胞吞噬全过程和意义。 掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。 二．实验原理 吞噬细胞由骨髓干细胞分化生成，具有非特异性免疫功能。当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又有趋化性，能响应招引因子的招引，产生活跃的变形运动，主动向病原体或异物移动，在接触到病原体或异物时，即伸出伪足将之包围，并内吞入细胞，形成吞嗜体，继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合形成吞噬性溶酶体，通过其水解酶作用，将病原体杀死，消化分解，最后将不能消化的残渣排除细胞外。 三．实验用品 1.器材：显微镜 解剖盘 剪刀 镊子 载玻片 盖玻片 注射器 吸管 2.试剂：A.0.85%生理盐水 B.alsever溶液（葡萄糖2.05g 柠檬酸钠0.89g 柠檬酸0.05g 氯化钠0.42g 蒸馏水100ml）将alsever溶液ph调至7.2，高压灭菌10分钟，保存于4℃冰箱中 。 C.0.4％台盼蓝染液 D.4.0％淀粉肉汤（牛肉膏0.3g 蛋白胨1.0g 氯化钠0.5g 蒸馏水100ml 含台盼蓝染液）加热后加入可溶性淀粉6.0g，促使溶解，再煮沸灭菌，置4℃冰箱中保存，用时水浴融化，加入适量台盼蓝染液混匀，使其成蓝色。 3.材料:A.小白鼠 B．1％鸡红细胞悬液（从健康鸡翼静脉采血1ml，放入盛有4mlalsever溶液瓶中，混匀置4℃冰箱中备用。用时加0.85％生理盐水离心，洗涤两次，再用生理盐水配成1％浓度悬液。） 四．实验方法 1.实验前一天给小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤1ml。 2.试验时，将注射过淀粉肉汤的小白鼠腹腔注射1％鸡红细胞悬液1ml，轻按小鼠腹部，使悬液分散。 3.二十分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。 4.将小鼠置于解剖盘中，剪开腹部，把内脏推向一侧，用不装针头的注射器或吸管取腹腔液。 5.取一干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，置显微镜下观察。 五．实验结果 图中椭圆形有核淡黄色细胞为鸡红细胞；较大的呈圆形或不规则细胞，内含蓝色颗粒的为巨噬细胞，仔细观察玻片，可见巨噬细胞吞噬红细胞的过程。 六．结果分析 1、通过观察，可发现巨噬细胞有伪足和细胞膜，伪足能够将外来异物包围，将外来物黏着在巨噬细胞的周围，细胞膜通过其流动性将外来异物吞噬并形成吞噬泡。 2、在显微镜下能观察到吞噬的动态过程，一个吞噬细胞可吞噬一到多个红细胞并将其分解。 4 10*100