课题1菊花组织培养.pptVIP

2.过程 二．影响植物组织培养的因素 (1)材料选取 ①不同的植物组织，培养的难易程度 差别很大。 ②同一种植物材料，材料的年龄、 长短也有影响。 ③菊花的组织培养一般选择 植株茎上部 。 * 专题3 植物组织培养技术 课题1 菊花的组织培养 组织培养是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 相关知识复习 1.细胞的分化 ①概念： 细胞在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 ②结果： 形成不同的细胞和组织 ③原因： 基因选择性表达的结果 ④特点： B.稳定性： C.普遍性： A.持久性： 是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度. 细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的. 2.细胞的全能性 ①定义： 已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能 ②原因： 已分化的细胞仍包含有该物种所特有的全套遗传物质 a.分化程度越高，全能性越低, 受精卵生殖细胞体细胞 ③全能性的比较: b.植物细胞动物细胞 1.理论基础：植物细胞具有 . 一.植物组织培养的基本过程 2.过程 全能性 离体的植物组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 生长发育 完整植株 离体的植物组织或细胞 脱分化: 愈伤组织: 再分化: 根、芽 生长发育 完整植株 由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程 细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞 菠萝的愈伤组织 愈伤组织：细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞 人参的愈伤组织 细胞离体 影响植物组织培养的必要条件： 一定的营养物质、激素和其他外界条件 无菌操作 保存时间 未开花 新萌生的侧枝 （3）、植物激素： （2）营养成分： A、 : N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 B、 : B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等 C、 :甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 大量元素 微量元素 有机物 ① 和 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素 生长素 细胞分裂素 植物组织培养常用的培养基是MS培养基，主要成分包括： ②生长素和细胞分裂素作用 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 分化频率高 同时使用 细胞既分裂也分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用生长素，后使用细胞分裂素 实验结果 使用顺序 生长素 细胞分裂素： 有利于根的分化 生长素 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑制根的分化 生长素 细胞分裂素： ＝ 促进愈伤组织生长 ③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响 （4）pH、温度、光照 pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每日用日光灯照射12h 植物组织培养过程总结: 离体组织或细胞 植物体 脱分化 细胞分裂素≈生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 生长素 再分化 不需要光 需要光 1、培育无病毒植株 2、 培养紫草愈伤组织,提取紫草素 4、培育转基因植株 三、植物组织培养的应用： 3、诱导离体的植物组织形成胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子 四、实验操作 （一）制备MS固体培养基 1、配制各种母液 2、配制培养基 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素。分装前需调节PH 3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 （二）外植体消毒 2、消毒 ①流水冲洗 ② 酒精处理 ③氯化汞消毒液处理 →吸干水分(无菌吸水纸) →0.1％氯化汞溶液1～2min→无菌水漂净3次 →吸干水分(无菌吸水纸) → 70％的酒精中摇动2 ～ 3次， →无菌水漂洗 *