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玉米虫害诱导基启动子的研究
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目 录
摘要………………………………………………………………………………………………………………………．．I
英文摘要……………………………………………………………………………………．11
1前言……………………………………………………………………………………………………………………．．1
1．1抗虫基因的研究进展……………………………………………………………………1
1．1．1Bc抗虫基因………………………………………………………………………．．1
1．1．2蛋白酶抑制剂基因…………………………………………………………………1
1．1．3凝集素基因………………………………………………………………………．．2
1．2植物的防御机制………………………………………………………………………．．2
1．3茉莉酸信号途径………………………………………………………………………．．3
1．4植物基因启动子………………………………………………………………………．．7
1．5本研究的目的和意义…………………………………………………………………．11
2材料与方法…………………………………………………………………………………．13
2．1材料……………………………………………………………………………………………………………．．13
2．1．1植物材料…………………………………………………………………………．13
2．1．2菌株及质粒………………………………………………………………………13
2．1．3试剂………………………………………………………………………………………………………．．13
2．1．4主要仪器设备……………………………………………………………………．13
2．1．5实验过程所用PCR引物…………………………………………………………．14
2．1．6常用培养基的配制………………………………………………………………．14
2．1．7实验所需试剂的配制………………………………………………………………14
2．1．8其它溶液配制……………………………………………………………………．16
2．2试验方法………………………………………………………………………………16
2．2．1启动子的克隆………………………………………………………………………16
2．2．2琼脂糖凝胶中DNA片段的回收(康为世纪胶回收试剂盒)……………………．．17
2．2．3在质粒载体中进行DNA克隆……………………………………………………．17
2．2．4酶切连接…………………………………………………………………………18
2．2．5质粒提取…………………………………………………………………………．19
2．2．6农杆菌感受态制备………………………………………………………………．19
2．2．7农杆菌转化………………………………………………………………………．19
2．2．8农杆菌的准备…………………………………………………………………………．20
2．2．9拟南芥种植及培养………………………………………………………………．．20
2．2．10拟南芥侵染………………………………………………。……………………20
2．2．1l转基因拟南芥的筛选……………………………………………………………20
2．2．12植物基因组DNA提取(CTAB法)…………………………………………．．21
万方数据
东北农业大学理学硕士学位论文
2．2．14
RT-PCR分析……………………………………………………………………………………………21
2．2．15荧光定量PCR……………………………………………………………………22
2．2．16
GUS组织化学染色…………………………………………………………………22
2．2．17植物总蛋白提取…………………………………………………………………23
2．2．18蛋
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