重金属超富集植龙葵(solanum nigrum l.)对cd耐受和富集的生理和分子机制初探.pdf

摘要 +龙葵(SolanumL．)是一种Cd超富集植物，为茄科茄属一年生或多年生草 nigrm 本植物。由于其生长周期短、对Cd富集能力强，生物量较大，因此成为植物修复机 理研究和应用的良好材料。本论文以龙葵为材料，(i)建立了高效的组培快繁体系； Cd响应的基因进行分离和鉴定，并对这些基因进行了初步研究。主要研究结果如下： 一、龙葵组培再生体系的建立 取龙葵下胚轴和成熟叶片做外植体，研究了愈伤诱导、从生芽分化和生根诱导3 个阶段的最佳培养条件。结果表明，以MS为基本培养基，下胚轴外植体以6-BA 0．5 5mg／L+NAAmg／L为宜，3周后愈伤诱导率达100％，增值系数为42；’叶片外植 体以6-BA 0．5 3mg／L+NAAmg／L为宜，3周后愈伤诱导率达100％，增值系数为28。 移栽至蛭石：营养土1：1的基质中，4周后开花，约6周后收获种子。 二、脯氨酸(Pro)在龙葵幼苗响应Cd胁迫中的作用机制 中的作用尚不完全清楚。我们以龙葵再生苗和下胚轴愈伤组织为材料，研究了Pro对 龙葵Cd胁迫下幼苗和愈伤生长的影响。结果表明：Pro通过提高超氧化物歧化酶 (SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性，以及细胞内总谷胱甘肽(total 量，降低了Cd胁迫下活性氧(ROS)的水平，保护了细胞膜的完整性，从而提高了龙 葵幼苗和愈伤组织对Cd胁迫的耐受性，并促进了Cd累积。 三、NO参与调节了Cd诱导的龙葵根系构型变化和Cd累积 Cd处理促进了龙葵侧根形成和不定根的发生。我们发现Cd毒害诱导了龙葵根尖 到抑制，并降低了Cd的累积，表明NO参与调节了Cd处理条件下侧根和不定根的 发生，改变了根系的结构，从而扩大了根系吸收面积，改善了植株对矿质营养和水分 的吸收。同时NO还参与调节了龙葵对Cd的吸收和累积。本研究为植物修复技术的 应用提供了理论基础。 四、龙葵Cd响应基因的鉴定、分离和初步分析 迹和半定量RT—PCR技术确认了这些基因在Cd胁迫下的差异表达模式。同源性分析 揭示出其中5个差异表达的片段与茄科植物的钙调节蛋白CAM、。抗坏血酸过氧化物 对这些基因在植物响应Cd胁迫中的作用进行了讨论。 关键词：超富集植物，龙葵，组培快繁，镉，抗氧化酶，一氧化氮，脯氨酸， 根系结构，mRNA差别显示 II Abstract in a discovered occurring Solanum newly Cd-hyperaccumulator nigrum三．is to andaccumulate soilswithcadmium．The orcont锄inated abilityuptake natural 24．6 this an ofcadmiuminits plant amounts leaves(1meCkg．DW)makes large effectofin our research the concerning effective knowledge，no