黑曲霉固态发酵梗制备的单宁酶转化茶叶儿茶素研究.pdf

黑曲霉固态发酵删备的单宁酶转化茶叶儿茶素研究 摘 要 单宁酶(EC 3．1．1．20)又称单宁酰基水解酶，它能够水解没食子单宁中的酯键和缩酚 键，产生没食子酸和葡萄糖。单宁酶在食品、化妆品、皮革工业中具有广泛的应用。目前 单宁酶的研究主要集中于菌种的选育及应用技术探索，而对于低成本的单宁酶发酵技术的 研究尚不足。本研究对单宁酶产生菌株JMU．TS528进行鉴定，用茶叶梗固态发酵制各单 宁酶，测定该单宁酶的酶学性质，研究其对乌龙茶和绿茶中儿茶素的转化作用。主要的实 验结果如下： 1)根据分子生物学鉴定和形态学观察结果，将单宁酶生产菌株JMU．TS528鉴定为 Aspergillusniger；用茶梗为原料对黑曲霉JMU．TS528进行固态发酵，经过硫酸铵沉淀、 离子交换层析和凝胶过滤层析等步骤制备获得单宁酶。 3．0．7．0和4．60oC之间具 2)该单宁酶的最适pH为5．5，最适温度为50oC，在pH SDS、Urea、Tween 80和Triton X．100对该单宁酶具有激活作用；该单宁酶能水解没食子 亲和性最强，而对GCG的最大反应速度和催化速率均最大。 分别提高了24．5％、24．5％和61．7％。同时水浸出物的茶乳形成量减少，稳定性增强。 本论文鉴定了一株产单宁酶的黑曲霉，以茶梗为原料固态发酵制备了单宁酶，确定了 该单宁酶的酶学性质，明确了其对乌龙茶和绿茶的儿茶素具有良好的水解活性，可提高茶 叶提取物的抗氧化活性及澄清度，为单宁酶的生产及应用提供了理论参考。 关键词黑曲霉，单宁酶，固态发酵，酶学性质，儿茶素，转化 Studiesonthe of BiotransformationTea-catechin using theTannasefrom Solid-state Aspergillus nigerby FermentationofTeaStem Abstract isalsonamedtannin breakdowns Tannase(E．C3．1．1．20)which acylhydrolase，specifically esterand bondsin tanninstorelease and acid．Ithas depside hydrolysable glucosegallic in andleatherindustries．Researchershavestudiedthe food，cosmetic importantapplictaions strain and the seldom the low—costfermentation breedingexploitedapplications，butinvestigated this strainJMU-TS528was was techniques．Instudy，atannase-producting identified，and