重组hgstp蛋白入胞机制的研究.pdf

_ 蝥 摘要 摘要 细胞株中丰度极高，且与肿瘤细胞的耐药性密切相关。对GSTPl的早期研究集中于分 子空间结构及其多态性和催化活性与上述人类疾病的关系，是目前所有人类GSTs中 研究最为广泛和深入的一种亚型。GSTPl属于机体内源性蛋白，不会引起免疫原反应， 在维持细胞的正常机能中发挥着重要作用，也是一种具有临床应用价值的抗氧化剂。 本实验室前期实验研究发现GSTPl在LPS引起的炎症中具有负向调控的功能，通 过下调相关的信号通路减少炎症因子的过量产生。在小鼠巨噬样细胞株RAW264．7中， B信号通路。此外还发现，通 LPS激活的MAPKs，包括ERK、JNK和p38，以及NF—K 的结果表明，通过腹腔注射GSTPl蛋白可以有效地抑制全身炎性反应。有文献报道 存在于细胞外，这表明它可以进行跨膜转运。在本课题中，就是对GSTPl蛋白的入 我们通过免疫印迹与流式细胞术观察到，培养液中添加的GSTPl蛋白可以进入小鼠巨 。可以转运至胞内在胞浆中发挥作用。实验结果表明外源的GSTPl的入胞随浓度的增加 而提高，无血清培养比有血清培养入胞效率高。在具体的入胞机制研究中，应用各种 内吞机制剂，发现能抑制网格蛋白介导的内吞作用的氯丙嗪对GSTPl入胞基本没有影 响，细胞松弛素D是肌动蛋白延伸的抑制剂，因而能抑制细胞的吞噬作用和巨胞饮作 用，但甲基一B一环糊精能抑制脂筏途径，在该种药物处理后，GSTPl的入胞明显受到 导的方式进入RAW264．7细胞，并具有温度和能量依赖性。 。效抑制与急性炎症反应相关的信号通路的活化，为治疗全身及局部炎性反应综合症提 供了一条新策略，并且该研究为GSTPl蛋白作为直接使用的药物在抗肿瘤、抗炎、抗 氧化等领域的应用提供了实验基础。 关键词：谷胱甘肽S一转移酶，内吞，脂筏 I IlJll、、1 Abstract TheresearchOilmechanismofhuman glutathione P1 intocells entering Abstract Human S-transferaseP1 isa which all protein plays glutathione ubiquitousexpressed roleinthedetoxificationandxenobiotics itisan metabolism，and important endogenous 1 atthe andtranslation protein．GSTPexpression，determinedtranscription 1evels，were LPSstimulationinRAW264．7 ofGSTPlinhibited upregulatedby cells．Overexpression LPS-induced ERK，肿：and8as