重组鸡α干扰素高效表达、复性纯化和抗病毒研究.pdf

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2015-11-06 发布于贵州
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重组鸡α干扰素高效表达、复性纯化和抗病毒研究

I lilt IIfl !Iflllll Ilrllllll Y1 787390 。，目求目录中文摘要……………………………………………………………………………………………．I 英文摘要…………………………………………………………………………………………。III l弓I言…………………………………………………………………………．…………………………………………………。l 1．1文献综述……………………………………………………………………………………．1 1．1．1干扰素简介………………………………………………………………………………l 1．1．2干扰素的分类和特点……………………………………………………………………l 1．1．3IFN-a…………………………………………………………………………………………………………………．1 1．1．4干扰素产生的机理………………………………………………………………………3 1．1．5干扰素发挥抗病毒活性的机理…………………………………………………………4 1．1．6鸡干扰素的研究概况……………………………………………………………………5 1．1．7基因工程药物……………………………………………………………………………．6 1．1．8包涵体的复性原理………………………………………………………………………7 1．1．9蛋白质体外复性的方法…………………………………………………………………．7 1．2研究的目的与意义……………………………………………………………………………8 2材车斗………………………………………………………………………………………………………………………………9 2．1质粒、宿主菌、病毒…………………………………………………………………………9 2．2细胞培养基、血清和胚………………………………………………………………………9 2．3酶和生化试剂…………………………………………………………………………………9 2．4软件和网站…………………………………………………………………………………。9 2．5主要仪器和设备………………………………………………………………………………9 ＼ 2．6主要试剂的配制……………………………………………………………………………10 3实验方法………………………………………………………………………………………．．12 3．1利用生物信息学优化设计鸡干扰素吨成熟蛋白基因……………………………………12 3．1．1稀有密码子的分析和优化………………………………………………………………12 3．1．2密码子适应性指数分析………………………………………………………………．12 3．1．3起始密码子区域的碱基优化…………………………………………………………．14 3．1．4终止密码子区域的碱基优化…………………………………………………………．．14 3．1．5密码子对的优化………………………………………………………………………．14 3．1．6表达水平的预测………………………………………………………………………．14 3．2全基因合成的鸡IFN．-a成熟蛋白的原核表达……………………………………………．15 3．2．1载体p、ⅣL．ChlFN．Q的构建……………………………………………………………15 3．2．2全基因合成鸡IFN．a成熟蛋白的原核表达及条件优化………………………………16 3．3蛋白的复性和纯化……………………………………………