氯化钙对小麦在盐胁迫培养下的缓解作用.docVIP

植物生理学实验技能测试 （设计性实验） 姓 名： 学 号： 班 级： 2010级农资班 实验时间： 2012.6.6-2012 . 氯化钙对小麦在盐胁迫培养下的缓解作用 一、实验目的： 1、研究盐分胁迫对小麦的影响外源钙盐胁迫条件下小麦种子的缓解作用及其机理 当植物受到逆境胁迫时 ,能通过提高细胞质的游离钙离子的浓度并通过 Ca2 + 与钙调素结合启动一系列生理生化过程 ,在作物对逆境胁迫的感受、传递、响应和适应过程中发挥重要作用 Ca=12.21A663-2.81A645（1）Cb=20.13A645-5.03A663（2）CT=Ca+Cb=8.05A663+20.29A645（3） Cx.c=(1000D470-3.27Ca-104Cb)/229（4） Ca—叶绿素a的浓度（mg/L）Cb—叶绿素b浓度（mg/L） CT—叶绿素的总浓度（mg/L） Cx.c—类胡萝卜素浓度（mg/L） 82.04和9.27—叶绿素a和叶绿素b在663nm下的比吸收系数 16.75和45.60—叶绿素a和叶绿素b在645nm下的比吸收系数 三、实验材料与用具： 1、材料：无胁迫、缓解前和缓解后的小麦叶片， 2、试剂：10 %的滤纸培养皿 四、实验步骤： 1、挑选大小一致、饱满的小麦籽粒 ,置于铺有一层的培养皿内 在一、二、三号培养皿中选取有代表性的小麦叶片，各称取0.2g剪碎后置于研体中，加入5ml 80%丙酮，少许CaCO3和石英砂。充分研磨（组织变白），再加10ml80%丙酮，静止3-5分钟，冲洗研体后转至离心管，定容至15ml,3000转、15分钟，取上清液用80%丙酮定容至25ml。 5、测定OD值： 取上清液1ml，加80%丙酮4ml，以80%丙酮作空白对照，用分光光度计分别测定叶绿素提取液在645nm、663nm、470 nm下的吸光度。 6、计算： 把测出的吸光值带入(1)(2)(3)(4)式计算叶绿素a、b、a+b和类胡萝卜素的浓度。根据下式求出植物组织中叶绿素的含量： 叶绿素的含量（mg/g)=c×v×n/m C—叶绿素的浓度（mg/L)； v—提取液体积(ml)；n—稀释倍数；m—样品鲜重（g) 五、实验思考题： 1、盐胁迫下钙离子对小麦影响