应用生物素-链亲合素系统的人血清CA19-9抗原固相酶免疫研究方法的建立与初步应用.pdf

应用生物素．链亲合系统的人血清CAl9-9抗原固 相酶免疫分析方法的建立及初步应用 摘 要 入生物素一链亲合素系统，建立了人血清CAl9-9抗原的固相酶 免疫分析法。以链亲合素包被聚苯乙烯微孔条，它能结合上生 物素化的C192单抗，与辣根过氧化物酶标记的cl92单抗一起， 对血清中的CAl9-9抗原形成夹心免疫复合物，对其进行定量测 定。 本文详细研究了生物素化抗体和酶标抗体的最佳工作浓度， 反应的动力学性质，底物显色动力学性质，以及在4℃下保存的 稳定性，对方法进行了全面的鉴定并进行了初步的应用研究。 实验采用两步法，第一步将生物素化抗体与血清中的CAl9-9抗 原结合到链亲合素包被的微孔板上，第二步加入辣根过氧化物 免疫复合物，最后加入TMB底物显色。该方法灵敏度为O．8u／ml， 浓度平均为157．0±489．2u／ml。 如以30u／ml为阳性界值，则对 胰腺癌检测的灵敏度为70．O％，特异性96．43％，说明该方法在 胰腺癌诊断中有重要价值。 关键词： CAl9-9抗原单克隆抗体 酶免疫分析 生物 素一链亲合素