重组DNA技术及基因工程药物2.ppt
分子伴侣或折叠酶复性: 分子伴侣:一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质,它们在细胞内帮助其他含多肽的结构完成正确的组装,而且在组装完毕后与之分离,不构成这些蛋白质结构执行功能时的组份 应用分子伴侣和折叠酶在体外帮助蛋白复性可以提高复性率, 但 分离较为繁琐,增加成本 人工分子伴侣复性 可加入去垢剂等,形成 蛋白-去垢剂 复合体,复合体的形成抑制蛋白的聚集, 加入 环糊精 去除 去垢剂 ,促使蛋白折叠 透析法: 简单; 但费时, 费缓冲液, 蛋白质浓度不能过高(容易产生沉淀) 快速稀释法: 最常用的小规模复性方法; 但比较费时,费缓冲液, 蛋白质的浓度不能高(容易产生沉淀) 超滤透析法: 比较省缓冲液, 处理量大; 但费时, 要控制好蛋白质浓度 凝胶过滤法: 快速, 可重复性高, 不会产生沉淀, 操作复杂一点 分子伴侣或折叠酶法:复性率率高, 但 分离较为繁琐,增加成本 包含体来源蛋白质的复性 ①活性蛋白回收率高 ②正确产物易于分离 ③折叠复性后能得到浓度较高的蛋白产品 ④折叠复性方法易于放大 ⑤复性过程耗时少 有效理想的折叠复性方法的特点 第十二节 基因工程药物的质量控制 基因工程产品相对于一般药品,有着许多不同之处 ①活的细胞作为表达系统来制备产品,产品分子质量大、结构复杂 ②具有显著效应,在微量情
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