《人红细胞膜损伤及茶多酚的保护作用》.pdf

香烟烟雾提取物诱导人红细胞膜损伤及茶多酚的保护作用 孙学敏 摘要: “吸烟有害健康”，近乎家喻户晓，人人皆知。香烟烟雾中含有多种 有害的化学物质，已被确认是多种疾病的主要诱因之一，并且在流行病学、细胞 遗传学和分子遗传等方面得到了广泛证实。本文以健康人红细胞为模型，研究香 烟烟雾提取物 (ograecttmskocxeratd，CSE)导致的细胞渗透脆性、细胞膜蛋白、 脂质过氧化水平和谷胧甘肤含量改变，以及对膜磷脂和脂肪酸的作用，以评估香 烟烟雾对细胞膜的氧化损害作用，同时对茶多酚类物质对这些损害的抑制作用进 行分析，为香烟烟雾对机体的损害机制及天然多酚化合物的防护作用提供分子水 平上的依据。 红细胞的正常生理功能与细胞膜结构的完整性有关，其中膜蛋白的组成和结 构变化均会对膜的通透性、变形性、物质运输、细胞识别以及酶的活性产生影响。 在本实验中，红细胞在经CSE处理后，其渗透脆性减弱，溶血率和MDA含量升高， GSH含量降低，这说明CSE对红细胞的抗氧化体系具有损害作用，这种损害与香烟 烟雾剂量增高呈正相关。进一步的研究发现，一定剂量的表没食子儿茶素没食子 酸酷(PEi参山0已越cchniaglatle，EGGc)对CSE诱导的红细胞氧化损伤有一定的防护 作用。 对生物膜的作用是香烟烟雾产生机体损害的首要环节。红细胞在经CSE处理 后，其膜蛋白的SDS聚丙稀酞胺凝胶电泳图谱发生明显改变。与空白对照比较，高 浓度的CSE可以导致一些膜蛋白聚集，生成高分子量聚集体，这些高分子量聚集体 主要来源于带2.6，带3，带4.3和带5蛋白。这些膜蛋白的聚集与CSE诱导的蛋白氧 化和二硫键重组，进而引起膜蛋白肤链交联密切相关。CSE处理的膜蛋白经DTT 还原后，电泳条带中无高分子量聚集体出现。EGCG对由CsE导致的蛋白条带的消 减有一定的抑制作用，但对由CSE引起的蛋白聚集无明显影响. 香烟烟雾对生物膜损害的另一方面是对膜脂质的作用。成熟红细胞的脂类主 要包含在膜内，脂类约占膜干重的40%，其中50%为磷脂。在磷脂中，磷脂酞胆碱 (PC)和磷脂酞乙醇胺 (PE)为主要组分。膜磷脂的组成及含量变化可反映膜的 结构和功能的改变。本研究采用高效液相色谱(HPLC)和气相色谱一质谱(CC.M)s 分析CSE作用后的膜脂质成分的变化，结果显示，红细胞膜中最主要的两种磷脂PE 和PC在CSE的作用下含量降低。在206mn处检测色谱分离的膜磷脂时，其信号主 要与磷脂分子中不饱和脂肪酸双键的含量有关，所以，PE和PC的分析值下降反映 了膜磷脂分子中不饱和脂肪酸的含量减少。另外，CSE中的一些组分导致磷脂分子 脂肪酸链水解也可能是细胞膜中磷脂含量减少的原因之一。 CSE可以导致膜脂质中不饱和脂肪酸含量降低。GC一MS结果显示，50mUL CSE可使红细胞膜中的的亚油酸和花生四烯酸消失，loomULCSE可使亚油酸、 花生四烯酸以及二十四碳一烯酸消失，300ml了LCSE处理红细胞后，膜脂质中仅 有饱和脂酸存在。50“创mLEGCG则对此具有一定的防护作用. 综上所述，香烟烟雾的水溶物对细胞的损害主要源于其中的氧化性物质和自 由基。红细胞在CSE的作用下，抗氧化能力降低，细胞膜的性质发生改变。这些 变化将影响整个机体的抗氧化能力。EGCG及其它类型的植物多酚化合物是目前 临床上应用最为广泛的植物药提取物。该类提取物已被证实对人的身体机能具有 广泛的有益作用，并对一些慢性疾病有辅助治疗作用。近年来，植物来源的药物 倍受青睐。本研究采用人红细胞为实验模型，发现EGCG可以部分消除CSE诱导 的细胞氧化损害，为茶多酚类物质作为抗氧化药物和在食品和保健品方面的应用 提供了理论上的依据。 关键词:香烟烟雾提取物 红细胞脂质过氧化膜磷脂 膜蛋白脂肪酸 茶多酚 Thcdamageofhumanerythrocytemembraneinducedby cigarettesmokeextractandinhibitedwithteacatechin Xue一M insun Abstrad:lthasbencwellidentifidethatciagrecttmsokccontainsavaretyofotxic hcemiaclswhi比acusetheofmrationofrcaCtivexoygcnspeclesnad