细胞生物学实验新教案.docVIP

辽东学院本科教案 课 程 教 案 （ 2010—2011学年第二学期） 课 程 名 称：细胞生物学实验 周 学 时：2 教 学 周 数：16 授 课 班 级：农业B0902 任 课 教 师：王丹丹 农 学　　院教 案（首 页） 课程编号 0514070071 授课 班级 农业 B0902 学生 人数 34 课程名称 细胞生物学实验 课程类型 公共基础课（）；学科基础课（）；专业基础课（√） 专　业　课（）；公共选修课（）；专业选修课（） 教学课型 理论（）实验（√）实训（） 考核方式 考试（√）考查（） 课程总学时 32 学 分 1.5 学时分配 实验32 学时； 教材名称 《细胞生物学实验教程》 教 学 参 考 书 参考书： 王金发、何炎明主编 《细胞生物学实验教程》 科学出版社，2004 授课教师 王丹丹 职称 助教 学科 生物 授课时间 2010.3～2010.7 授课地点 生物技术实验室 实验一 显微镜的使用及显微摄影技术 授课时数：（本次课学时数——2） 　　教学课型：实验课 一、教学目的与要求 1．了解显微镜各部分的名称结构和功能学习普通光学显微镜荧光显微镜倒置显微镜等的构造和方法.2．掌握显微摄影的基本方法学会视差校正曝光控制1．了解显微镜各部分的名称结构和功能学习普通光学显微镜荧光显微镜倒置显微镜等的构造和方法.2．掌握显微摄影的基本方法学会视差校正曝光控制随着科学技术的发展，显微镜检方法由最传统的明视野、暗视野发展出了相差法、偏光方法；荧光方法也由透射光激发进展为落射光激发，使荧光效率大为提高；微分干涉相衬方法基于偏光方法，而巧妙地利用了微分干涉棱镜，使之能应用于医学与生物学的样品，又能应用于金相样品的分析与检验。 　　教学课型：实验课 一、教学目的与要求 通过对洋葱内皮细胞的处理，了解植物细胞骨架的结构特征及其制备技术与显微形态观察。 二、教学重点与难点 了解植物细胞骨架的结构特征及其制备技术与显微形态观察。 三、实验原理： 细胞骨架在细胞中呈由蛋白纤丝交织成的立体网状结构，并且处于动态变化中。细胞骨架在胞质、细胞核、质膜、胞壁中都有分布，参与细胞形态维持、物质运输、信号转导等作用。处于不同生理状态的细胞其细胞骨架有变化，可根据细胞骨架推测细胞所处生理阶段。 四、作业、讨论、实验（实训）、案例 绘制你所观察到的植物细胞骨架图象； 戊二醛、考马斯亮兰R250、TritonX-100是什么？在本实验中各起什么作用？ 五、参考资料 中国生物论坛/ 六、教学内容与教学过程（教学设计） 提出本学期的学习计划及上课要求 讲授本节内容 一、课前准备 二、讲解原理、步骤、注意事项及演示 三、学生操作：实验方法与步骤 撕取洋葱鳞茎内表皮细胞（约1cm2大小若干片）置于装有pH6.8磷酸缓冲液的50ml烧杯中，使其下沉； 吸去pH6.8磷酸缓冲液，用1% TritonX-100处理20min； 吸去1% TritonX-100，用M-缓冲液洗三次，每次8min； 3%戊二醛固定30min； pH6.8磷酸缓冲液洗三次，每次8min； 0.2%考马斯亮兰R250染色20min； 用蒸馏水洗1-2次，将内表皮细胞平铺子载玻片上，加盖玻片，于显微镜下观察。 七、课后小结 实验三 DNA的细胞化学——Feulgen反应 授课时数：（本次课学时数——2） 　　教学课型：实验课 一、教学目的与要求 了解Feulgen反应的原理，掌握有关的操作方法。 二、教学重点与难点 Feulgen反应的原理及有关的操作方法。 三、实验原理： 自Feulgen等发明该显示DNA的Feulgen反应法以来，其作用机制也久经研究和讨论，现已取得一致意见。其具体反应原理是，标本经稀盐酸水解后，DNA分子中的嘌呤碱基被解离，从而在核糖的一端出现了醛基。Schiff试剂中的无色品红可与醛基反应，形成含有醌基的化合物分子, 因醌基为发色团，故可呈现出紫红色。也就是说, DNA经稀酸水解后产生的醛基，具有还原作用，可与无色品红结合形成紫红色化合物，从而显示出DNA的分布。其反应机制如下图所示。 2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3  四、作业、讨论、实验（实训）、案例 1、简述Feulgen反应的原理和实验的关键步骤。 2. 绘图示洋葱根尖细胞或鳞茎表皮细胞DNA的分布部位。 五、参考资料 中国生物论坛/ 六、教学内容与教学过程（教学设计） 课前提问 复习上节细胞的内容，引入新课 讲授本节内容 一、课前准备 二、讲解原理、步骤、注意事项及演示 三、学生操作：实验方法与步骤 1．将洋葱根尖或鳞茎内表皮放在1N HCl中，加热到60℃水解8～10