CIK分泌的细胞因子对逆转耐顺铂肺腺癌细胞系A549／DDP耐药性的研究.pdfVIP

中国肿瘤临床2013年第403g-~12期 ChinJClinOncol2013，Vo1．40No．12WWW．cjco．ciq 685 基础研究 · ClK分泌的细胞因子对逆转耐顺铂肺腺癌细胞系 A549／DDP耐药性的研究：l： 熊艳娟① 杜春娟② 于津浦① 曹 水① 摘要 目的：探讨细胞因子诱导的杀伤细胞 (cytokineinducedkiller，CIK)分泌的细胞 因子在逆转耐顺铂 (DDP)人肺腺癌细 胞系A549／DDP顺铂耐药性中的可能作用。方法：采用transwell非接触共培养CIK与A549D／DP细胞，收集不同时间点的共培养 上清，酶联免疫试剂方法(ELISA)检测IFN一 、TNF一 、IL一2的分泌情况，四氮甲唑兰比色法(MTT法)检测DDP耐药性的变化，实 时定量PCR检测GST一盯基因表达水平的变化。结果：分析发现A549／DDP细胞的耐药逆转与IFN一 的分泌水平显著相关，与 TNF—ol、IL一2的分泌量无显著相关。给予anti—IFN一 中和抗体后，共培养20hA549／DDP的DDP耐药性显著上升(P0．05)，GST一叮T 基因水平的表达量较未加 中和抗体组也显著增加 (P0．05)。而加入anti—TNF—ot、anti—IL一2中和抗体组，A549／DDP细胞的DDP耐 药性及GST一丌基因水平的表达量较未加入 中和抗体纽无明显变化 (P0．05)。结论 ：CIK通过分泌IFN一下调A549D／DP细胞 中 GST一^y的表达来实现其逆转DDP耐药的作用。 关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞 肺腺癌 GST一1T IFN一 doi：10．3969／j．issn．1000—8179．2013．12．001 Cytokinessecretedbycytokine．．inducedkillercellsmodulateresis．． tancetocisplatinintheA549／DDPcellline YanjuanXIONG。，ChunjuanDU，JinpuYU ShuiCAO Correspondenceto：ShuiCAO；E—mail：caoshui@yahoo．com DepartmentofCancerBiotherapy,TianjinMedicalUniversityCancerInstituteandHospital，KeyLaboratoryofCancerPreven— tionandTreatmentofTianjinCity,Tianjin300060，China DepartmentofOncology,BinzhouMedicalCollege，Binzhou256603，China ThisworkwassupportedbyfundationsfromtheTianjinMunicipalResearchProgramforBasicSciencesandFrontierTechnolo— gY(No．09JCZDJC20400) Abstract Objective：Thisstudyaimedtoexplorethepossiblerolesofcytokinessecretedbycytokine—inducedkiller(CIK)cells inreversingtheDDP resistanceofA549／DDP．M ethods：Supernatantsofco—culturedsystemswerecollectedtodetectthelevelsof IFN一1，，TNF—d，andIL一2usingenzyme—linkedimmunosorbentassay(ELISA)．Thecorrelationsbetweencytokinesandresistancerever— salindiceswereanalyzedatdifferentco—culturedtimepoints．SpecificneutralizingantibodiesagainstIFN—Y，T