腺病毒-甲病毒杂合载体的构建及其病毒制备.pdf

中文摘要 中文摘要 基因转移载体有很多种，各有特色，其中腺病毒载体(Ad朗0Vector，Ad) 由于感染细胞类型广、感染效率高、既能感染分裂期也能感染非分裂期细胞、不 整合入细胞基因组(遗传毒性较低)、容易制备高滴度病毒、理化性质稳定等优 点被广泛用于肿瘤的基因治疗。然而常用的5型腺病毒(Ad5)载体对造血细胞 感染效率很低，限制了它在白血病基因修饰瘤茸中的应用。 腺病毒主要是通过其五邻体的纤维(Fiber)识别细胞表面的腺病毒受体进入 细胞，不同血清型腺病毒的细胞靶向性可能不同，对Fiber进行结构改造或血清 型替换将改变腺病毒的靶向性。为了提高Ad5对造血细胞的感染效率，本实验 室前期工作对Ad5载体的纤维顶球进行了改造，将其替换为B组11p型腺病毒 的感染效率有了较大提高(约为Ad5的10倍)，但对原代白血病细胞(尤其是 淋巴系白血病细胞)的感染效率仍然较低。 能高效地在哺乳动物细胞表达外源基因，在疫苗制备中已经得到广泛应用。甲病 毒高效表达外源基因的原因是其在转录水平调控产生了大量外源基因的mRNA。 但甲病毒难以进入造血细胞。如果将Ad5F1lp载体的造血细胞靶向性与甲病毒 高效转录的特点相结合，有可能进一步