《多重耐药肺炎克雷伯菌质粒介导耐药性传播特性研究》.pdfVIP

主堡 壁 2014年8月第7卷第4期 ChinJClinInfectDis．Au st2014．v01．7．No．4 · 295 · 论 著 · 多重耐药肺炎克雷伯菌质粒 介导耐药性传播特性研究 顾洪琴 嵇金如 沈萍 【摘要】 目的 了解多重耐药肺炎克雷伯菌克隆播散状况及质粒介导耐药性的传播特性。方 法 连续收集2009年 12月至2012年2月分离 自浙江大学医学院附属第一医院的53株非重复多重 耐药肺炎克雷伯菌。采用K—B纸片法进行药敏试验，脉冲场凝胶 电泳 (PFGE)进行临床菌株克隆分 型，滤膜接合法进行质粒接合试验。采用 s1酶切结合 PFGE的方法判读质粒的相对分子质量，并采 用PCR扩增筛选接合菌株的常见耐药基因。结果 53株肺炎克雷伯菌对青霉素类药物的耐药率为 100％；对哌拉西彬 他唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦等混合制剂的敏感率低于 15％；对头孢菌素的耐药 率也很高，在86％以上；对喹诺酮类、磺胺类和四环素类药物的耐药率为60％ ～70％；且50％左右的 菌株对碳青霉烯类药物不敏感。PFGE分型显示这些菌株克隆传播趋势不明显。耐药菌株常携带可 接合性耐药质粒，质粒的相对分子质量为34000～355000bp，编码对青霉素类、头孢菌素类 、碳青霉 烯类 、氨基糖苷类等药物耐药的多种基因，包括 CTX—M型、TEM型、KPC型 B一内酰胺酶基因，以及质 粒介导喹诺酮耐药基因qnr等。结论 临床分离的肺炎克雷伯菌多重耐药形势严峻，耐药性的快速 传播已不是同源克隆细菌的简单播散，而是可接合性质粒的耐药基因快速水平转移。 【关键词】 克雷伯菌，肺炎；抗药性，多药； 质粒；接合，遗传 Spreadofplasmid-mediatedresistancein multidrugresistantKlebsiellapneumoniae GuHongqin ， JiJinru，ShenP ． ClinicalLaboratory，theThirdPeople’SHospitalofHangzhou，Hangzhou310003， China Correspondingauthor：ShenPng，Email：shenping123451@ 126．com 【Abstract】 0bjective Toinvestigatethespreadingcharacteristicsofplasmid—mediatedresistance andtheclonesdisseminationinmuhidrugresistantKlebsiellapneumoniae．M ethods A totalof53strainsof multidrugresistantKlebsiella pneumoniaewere successively collected from theFirstAmliated Hospita1． ZhejiangUniversitySchoolofMedicineduringDecember2009andFebruary2012．Antimicrobialagents susceptibilitywasdeterminedbyKirby—Bauer(K—B)method，andpulsedfieldgelelectrophoresis(PFGE) wasused to investigate the clonality ofclinicalisolates．Filter mating method wasused for plasmid conjugation，andtherelativemolecularmassoftheplasmidwasdeterminedusingS1一PFGEassay．PCR amplificationandsequencingwereused toscreen commonantimicrobialresistancegenes．Results Fifty— threeclinicalisolatedKlebsie