《富士苹果MdWRKY40b基因克隆及其对白粉病的抗性分析》.pdfVIP

西北植物学报 ，2013，33(12)：2382—2387 ActaBot．Borea1．-Occident．Sin． 文章编号 ：1000—4025(2023)12—2382—06 富士苹果MdWRKY40b基因克隆及其 对 白粉病的抗性分析 罗昌国 ，袁启凤 ，裴晓红 ，吴亚维 ，郑 伟 ，章 镇。 (1贵州省果树科学研究所 ，贵阳 550006；2南京农业大学 园艺学院，南京 210095) 摘 要 ：WRKY是植物抗病相关的一个大转录因子家族基 因，为 了揭示 WRKY40基 因在调控 白粉病抗性方面 的 作用，以富士苹果 (MalusdomesticaBorkh．CV．Fuji)为试材，利用特异引物进行 RT-PCR基因克隆，并用实时荧光 定量PCR方法分析组织中基因的表达及接种苹果 白粉菌和用 1mmol·I 水杨酸 (SA)喷施处理后对基因表达的 影响。结果表明：(1)克隆到的片段长度为 1240bp，包含一个完整的开放阅读框，长 1002bp，编码 334个氨基酸， 其氨基酸序列与 AtWRKY40、H wRKy1／2／3等 8个序列一致性为 48．96 ；该基 因与拟南芥 AtWRKY40同源 ， 故命名为MdWRKY40b，GenBank登录号为JX1129o7。(2)基因表达分析表明，MdWRKY40b在苹果根、茎、叶、花 均有表达，其中根、叶、花中表达量基本相当，茎中表达量最低。(3)该基因明显受苹果 白粉菌和 SA 的强烈诱导表 达且持续时间较长 ，并且两者表达趋势相同、出现最高表达量 的时间相近 。研究推测 ，富士苹果容易感 白粉病的主 要原因可能与 MdWRKY4Ob的持续长时间的高表达有关 。 关键词 ：苹果；WRKY转录因子 ；白粉病 ；抗病性 ；水杨酸 中图分类号 ：Q785；Q789 文献标志码 ：A CloningofMdWRKY40bGeneinFujiApple andItsResponsetoPowderyM ildew Stress LUO Changguo ，YUAN Qifeng ，PEIXiaohong ，WU Yawei，ZHENG Wei，ZHANG Zhen (1InstituteofFruit，GuizhouAcademyofAgriculturalScience，Guiyang550006，China；2CollegeofHorticulture，NanjingAgri culturalUniversity，Nanjing210095，China) Abstract：WRKY iSthegenesofasupertranscriptionfactorsfamilythatrelatedtodiseaseresistance．Inor— dertorevealtheroleofWRKY40 genein responsetopowderymildew stressinapple．M alusdomestica Borkh．CV．FujiwasusedforgenecloningbyreversetranscriptionPCRamplificationbyusingspecificprim— ers．Quantitativereal—timePCR wasusedinanalyzinggeneexpressionintissuesandinresponsetoPo— dosphaeraleucotrichaandtreatmentof1mmol·L SA (salicylicacid)．(1)A 1240bpfragmentincluding a1002bpopenreadingframetoencode334aminoacidswasisolated．Theaminoacidssequenceshare 48．9V0identityBLASTptoAwRKy40，HvWRKY1／2／3andothers4sequences．Itisahomologousgene ofArabidopsisAtWRKY40，anditiSnamedasM WRK】，4O6．ItsGenBankaccessioniSJX112