干细胞临床应用概述广州空军医院神经外科中心.docVIP

干细胞临床应用概述 项目的技术可行性 1.干细胞的特性与干细胞临床应用技术的原理 干细胞是具有自我复制、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体，随着干细胞技术的发展以及干细胞本身所具有的特性，使得人类有可能在体外培养某些干细胞。定向诱导分化为我们所需要的各种组织细胞以供临床所需， 以此为目的的干细胞技术与干细胞治疗几乎涉及人体所有的重要组织和器官，也涉及人类面临的大多数医学难题，如心血管疾病、自身免疫性疾病、糖尿病、骨质疏松、恶性肿瘤、老年性痴呆、帕金森病、严重烧伤、脊髓损伤和遗传性缺陷等疾病的治疗。 2.支持开展本项目的研究工作基础 北大干细胞中心在国家“863”“973”项目和北京市科委重大项目的支持下，建立了完整的干细胞基础研究和针对部分疾病的动物实验研究和临床研究体系，并取得了有价值的研究成果，为本项目的实施提供了良好的基础。 1）、建立了间充质细胞系（骨髓及脐血来源），建立细胞分离、培养、鉴定的技术平台 间充质细胞的分离培养 间充质干细胞的分离、培养及扩增： 间充质细胞表面分子的检测 间充质细胞可以表达VEGF 间充质细胞体外分化能力的鉴定 间充质细胞在体外可以诱导向软骨，骨，肌组织和脂肪分化 2）、建立了视网膜色素细胞来源的神经前体细胞（hRPE），建立细胞分离、培养、鉴定的技术平台； 视网膜色素细胞来源的神经前体细胞（hRPE）是一种单能干细胞，可以自我复制并表达酪氨酸羟化酶，可分泌多巴胺，并且表达特殊表面分子而避免免疫排斥反应，hRPE细胞组织来源为眼库的视网膜，通过组织培养法获得贴壁的细胞，传代后进行纯化鉴定，采用流式细胞仪检测其特异性表面标记为。 3）、建立了人源神经干细胞系和体外鉴定体系； 已建立可长期传代培养的人源的神经球，在无血清培养环境中下，神经球经过体外长期传代培养，不断地清除原组织来源的混入神经球的非干细胞成分，从而获得大量高纯化的神经干细胞，体外已连续传代8个月以上，1：3传代，传代次数超过40代，nestin阳性细胞数大于90%，可冻存复苏，体外定向诱导分化为神经元和神经胶质，为未来的研究和临床应用提供大量的神经系统的种子细胞。 三．本项目涉及干细胞技术的成熟度： （一）关键技术的描述： 间充质干细胞的培养、扩增传代及鉴定是北大干细胞中心的关键技术，间充质干细胞具有来源广泛、容易培养和扩增的技术优势，在多年培养经验中，我们总结出了标准化的间充质培养、鉴定流程和质量控制体系，保证培养技术体系的稳定性和可控性。 2． 神经干细胞和hRPE干细胞是本项目涉及的另一项关键技术，建立 了人视网膜色素上皮细胞的神经干细胞系，掌握了神经干细胞诱导分化，以及生物活性及分子标记鉴定技术，开展了帕金森动物模型的移植工作、相关的术后定量定性鉴定和行为学观察、细胞安全性鉴定，积累了临床试验的数据。 （二）动物试验结果证明，本项目所涉及的干细胞移植对多种疾病具有较好治疗作用和安全性。 针对不同疾病动物模型的细胞示踪观察结果表明，干细胞可在特定部位存活和产生定向分化；干细胞移植的疗效评价结果表明，干细胞移植可产生确定的疗效。通过细胞移植到裸鼠皮下六个月观察细胞的致瘤性和通过细胞抽提液对动物的刺激性以及致敏性的观察证实，本项目所涉及的干细胞无致瘤性，无致敏性，无刺激反应，可以保证临床应用的安全性。 （三）我们已开展的临床应用的结果表明干细胞对于多种神经系统疾病、缺血性心脏病均具有良好的治疗作用。 （四）国内外已开展的干细胞临床应用研究数据为实施本项目提供了有利的依据： 1、神经系统疾病 干细胞移植挽救人类重大神经系统疾病覆盖神经系统退行性病变如脊髓侧索硬化、帕金森病、早老性痴呆，神经系统损伤性病变包括急性脊髓原发性损伤和继发性损伤、脑血管疾病导致的脑出血和脑梗塞、小儿脑瘫。目前，细胞移植已成为脊髓损伤(SCI)修复研究的热点之一，已有部分患者受益于干细胞移植。 神经干细胞已成为治疗神经系统疾病的一种新型而且很有希望的治疗手段。在国内目前据相关统计，通过神经干细胞已经治疗脑血管病后遗症患者共200余例。治疗运动神经元病患者100余例，以及其他涉及治疗老年痴呆，脑梗塞，脑中风，脑萎缩，脑出血等疾病的患者也达到100余例，所治患者中对于脑出血后遗症患者的治疗效果较明显，有效率达80%以上。HRPE来源的“神经干细胞注射液”是一种治疗帕金森氏病的干细胞产品也正在中检所进行注册检验，产业化中试基地已经建成，可进行干细胞产品的中试及其生产工作。 2、外周血管疾病 外周血管疾病包括下肢动脉硬化性闭塞症、糖尿病足和血栓闭塞性脉管炎等。2002 年 Tateishi2Yuyama 等在首次报道了应用骨髓干细胞移植治疗下肢缺血性疾病的临床研究 ,45 个动脉缺血的下肢接受了自体 BM2MNC 移植,结果显示