高考生物人教版山西省运城银星学校基础知识检测23DNA和蛋白质技术.docVIP

DNA和蛋白质技术 ★一、DNA的粗提取与鉴定 1．思路利用DNA与RNA、蛋白质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 2．原理 （1）利用DNA的溶解性 ①DNA和蛋白质等其他成分在 中溶解度不同，盐浓度为 mol/l时，DNA溶解度最小。 ②DNA不溶于酒精溶液，某些 则溶于酒精。 （2）利用DNA的耐受性 ①蛋白酶水解：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。 ②高温变性：大多数蛋白质不能忍受60℃—80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。 ③洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 3．实验设计 （1）材料的选取：选用 相对较高的生物组织。 （2）细胞的破碎（以鸡血为例） 鸡血细胞 用 收集滤液。 （3）杂质的去除：方案之一是利用DNA在不同浓度的NaCl中溶解度的不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。具体做法：在滤液中加入 ，使NaCl溶液的浓度为 mol/ L，过滤除去不溶的杂质，再加 调节NaCl溶液的浓度为 mol/ L，析出DNA,过滤除去溶液中的杂质，在我用2 mol/ L的溶液溶解DNA。 （4）DNA的析出：处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等