大草蛉化学感受蛋白基因CpalCSP3组织表达谱及气味结合特性分析.pdfVIP

棉 花 学 报 Co~onScience 2015，27(3)：26O一267 大草蛉化学感受蛋白基因CpalCSP3组织表达谱及气味结合 特性分析 王思豹 ，张帅 ，雒瑁瑜 。，李兆群 ，吕丽敏 ，王春义z，崔金杰 ，董双林t (1．南京农业大学植物保护学院 ／农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室，南京210095；2．中国农业科学院棉花研 究所 ／棉花生物学国家重点实验室，河南 安阳455000) 摘要：昆虫化学感受蛋白(Chemosensoryprotein，CSP)具有结合和运载气味分子穿过感器淋巴液到达嗅觉受体 的作用，但尚未见有关大草蛉(Chrysopapaliens)CSP功能的报道。本研究克隆得到大草蛉CpalCSP3基因．利用 RT—qPcR技术测定 了其在成虫各组织的表达谱 ，发现CpalCSP3基因主要在雌雄虫的触角和头部表达．暗示 该基因参与了大草蛉的嗅觉及味觉感受。为探讨其嗅觉功能，利用原核表达系统和荧光竞争结合试验测定 了 CpalCSP3蛋白与84种气味物质的结合能力。结果表明，CpalCSP3蛋 白与橙花叔醇 、(+)一雪松醇和B一紫罗兰 酮具有很高的结合能力，结合常数(KJ为8．79～9．79Ixmol·L_。；与根皮苷、月桂醛、乙酸香叶酯和ot一蒎烯也有 较高的结合能力，Ki为l1．54～19．06p~molL·_。。分析认为，CpalCSP3蛋 白可能在大草蛉对这些气味的嗅觉感 受中起作用，使得大草蛉能对害虫寄主植物有效定向进而搜寻到猎物。 关键词：大草蛉；化学感受蛋白；组织表达谱 ；原核表达：荧光竞争结合试验 中图分类号：$435．622 文献标志码：A 文章编号 ：1002—7807(2015)03．0260．08 DoI：l0．11963／issn．1002．7807．201503010 TissueExpressionProfileandkigandBindingAffinityoftheChemosensoryProtein GeneCpalCSP3inChrysopapallens(Rambur) WangSibao，ZhangShuai，LuoJunyu2，LiZhaoqun ，LfiLimin，WangChunyi，CuiJinjie，DongShuan glin (1．CollegeofPlantProtection，NanjingAgriculturalUniversi~／K LaboratoryofIntegratedManagementofCropDiseases andPests,MinistryofEducationNanjmg210095China；2．StateKeyLaboratoryofCo~onBiology InstituteofCottonRe． search，ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Anyang,Henan455000，China) Abslract：Insectchemosensoryproteins(CSPs)playimportantrolesinolfactoryperceptionbytransportinghydrophobicchemical volatilesacrossthesensillum lymphtoolfactoryreceptors，butthisroleinChrysopapallens(Rambur)hasnotbeenaddressed．In thispaper，aCSPgeneCpalCSP3wasclonedandthetissueexpressionprofileoftheCpalCSP3geneinmaleandfemaleadults wasdeterminedbyreal—timequantitativepolymerasechainreaction．ResultsshowedthattheCpa／CSg3genewashighlycx— pressedinhteheadsandantennaeofbothsexes，suggestingitsinvolvementinolfactionandgusmtio