富血小板凝胶促软骨细胞增殖的体外实验研究.pdfVIP

局解手术学杂志　 2015 年 第24 卷　 第4 期　 　 J REG ANAT OPER SURG,2015,Vol.24,No.4 ·387 · 富血小板凝胶促软骨细胞增殖的体外实验研究 1 2 1 1 1 康　 健 ,袁　 文 ,常正奇 ,孙海宁 ,于秀淳 　 (1.济南军区总医院骨病科,山东 济南 250031;2.上海长征医院骨科,上海 200003) 　 　 [摘　 要]　 目的　 利用二次离心法制备富血小板凝胶,将其与软骨细胞复合,观察软骨细胞增殖与表达,为组织工程软骨构建 提供良好支架材料。方法　 将兔静脉血使用二次离心法制备富血小板血浆,检测其中多种生长因子浓度,并与分离培养的兔软骨 细胞混合后以激活剂激活,培养并以MTT法观察软骨细胞增殖情况,使用realtime-PCR方法检测软骨细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原和 SOX-9基因表达,并与普通培养软骨细胞比较,明确富血小板凝胶与软骨细胞混合后软骨细胞增殖表达情况。结果　 富血小板凝胶 萃取液中PDGF-AB、TGF-β1、IGF-1、VEGF生长因子浓度明显高于全血(P 0.05)。 富血小板凝胶与软骨细胞复合培养,软骨细胞 增殖速度明显高于普通培养软骨细胞(P0.05)。 培养7 d后检测软骨细胞中蛋白聚糖、Ⅱ型胶原和SOX-9基因表达明显高于普 通软骨细胞(P0.05)。 结论　 富血小板凝胶与软骨细胞共培养,可明显促进软骨细胞增殖和表达,是优良的组织工程软骨构建 方案。 　 　 [关键词] 富血小板凝胶;软骨细胞;组织工程;生长因子 　 　 [中图分类号] R684　 [文献标识码]A　 [文章编号] 1672-5042(2015)04-0387-04 Study of proliferation of chondrocytes co-cultured with platelet rich gel 1 2 1 1 1 KANGJian ,YUANWen ,CHANGZheng-qi ,SUNHai-ning ,YUXiu-chun 　 (1.BoneSection,General HospitalofJinan Military Region,People’s Liberation Army,Jinan Shandong 250031,China;2.Department of Orthopaedics,Shanghai Changzheng Hospital, Shanghai200003,China) 　 　 Abstract:Objective　 Preparing plateletrichgelthroughtwo-timescentrifugaltechniqueandco-culturingchondrocyteswithPRG,then observing the proliferation and gene expression of chondrocytes,in order to provide a favorable way to prepare tissue engineering cartilage. Methods　 Centrifugating venousblood of rabbit through two-times centrifugal techniqueto obtain platelet rich plasma(PRP),then detecting the concentrationofvariousgrowthfactorinPRP.AdmixingPRPwithchondrocytesofrabbitandactivatingthemwithactivator.Afterco-culti- vation,theproliferationofchondrocytesthroughMTTmethodandexpressionofACAN,Collagen ⅡandSOX-9throughrealtime-PCRwereob- served,and comparedwith common cultured chondrocytes. Results　 The concentrations of PDGF-AB,TGF-β1,IGF-1 and VEGF in PRG were significantly