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南方园艺SouthernHorticulture2015，26(4)：11—14 影响广西柳州野生葡萄外植体灭菌效果的相关因子研究 李彬，岑秀芬，韦鹏霄，徐石兰，黄家达，李祖潭 (广西大学农学院，广西南宁530004) 摘要：以带腋芽的广西柳州野生葡萄茎段为外植体，研究0．I％HgCl：不同灭菌时间、75％酒精和0．1％HgCl2两种灭 菌剂组合对其灭菌效果的影响；同一灭菌处理对其不同茎段部位灭菌效果的影响；不同取材季节同一灭菌处理对其灭 1．0 0．1 菌效果的影响。采用同一培养基(MS+6BAmg／L+NAAmg／L+糖30g／L+琼脂6g／L)对灭菌后的外植体进行培养。 试验结果表明：0．1％HgCl：灭茵时间越长，对野生葡萄外植体的灭菌效果越好，但出芽率则随灭菌时间增加呈先上升达 最大值后逐渐下降的趋势；两种灭菌剂组合随75％酒精灭菌处理时间越长灭茵效果越好，但出芽率则随灭菌时间增加 呈先上升达最大值后再下降的趋势；在同一灭菌处理下，以茎段上端部位的灭菌效果最好，出芽率最高；在春季取材， 灭菌效果最佳，出芽率最高。 关键词：广西柳州；野生葡萄；取材季节；取材部位；外植体灭菌；离体培养 中图分类号：$663．1 文献标识码：A 野生葡萄又名山葡萄，是葡萄科(Vitaleae)葡萄从顶芽往下数第四节至第六节；嫩茎下端为从顶芽往 属(Vitis)多年生落叶藤本，为多年生藤本攀缘果树。下数第七节至第九节。分别置于流水下冲洗10min， 中国野生葡萄资源丰富[11，其抗病、抗寒、抗湿力强，是用牙刷仔细刷除茎段和茎尖上的绒毛，涮洗2遍后将 优良的抗寒砧木，在野生环境中具有很强生长能力， 新梢剪成3—4cm长、带侧芽的单芽茎段，分装于无菌 是抗病抗逆育种的重要种质资源f2，31。在自然条件下，玻璃瓶中。在超净工作台上进行不同灭菌处理：(1)用 min、14min、 野生葡萄扦插难以生根【4】，而压条和嫁接等方面的研 min、10min、12 0．1％HgCl2分别灭菌8 s+ 究报道尚少，组织培养繁殖系数也较低[51，葡萄叶片、 16 s、20s、30s、40 min；(2)以75％酒精分别灭菌10 1种葡萄 叶柄、茎段再生较为困难【6】。迄今为止，已有1 min。灭菌处理后用无菌水反复冲洗4～5 0．I％HgCl：14 属植物成功地再生出植株，并已被部分学者应用于葡 cm长的小段接入培养基中，每瓶 次，将茎段剪为1～2 萄遗传转化，获得少量转基因植株【7_101，但对广西柳州 接种1个茎段外植体。 野生葡萄品种的组织培养尚未见有报道。笔者通过对 1．2．2培养基培养基采用MS为基本培养基，试验 广西柳州市柳城县野生葡萄茎段的离体培养，再生出 1．0 O．1 中所用的培养基组合为：Ms+6-BA mg／L+NAAmg／+ 不定芽，建立起广西柳州野生葡萄再生体系，旨在为 糖30