白粉菌侵染后的拟南芥酵母双杂交cDNA文库构建及其利用.pdfVIP

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2015-11-22 发布于湖北
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白粉菌侵染后的拟南芥酵母双杂交cDNA文库构建及其利用.pdf

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白粉菌侵染后的拟南芥酵母双杂交cDNA文库构建及其利用.pdf

植物病理学报 ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA 45(4)：370—375(2015) doi：10。13926／j。cnki．apps。2015，04．005 白粉菌侵染后的拟南芥酵母双杂交 cD NA文库构建及其利用黄衍焱1，杨玲珑2，王莹1，李冉1，鲁黎明2，王文明¨ (1I四Jfl农业大学水稻研究所，成都611130；2IⅡt)ll农业大学农学院，成都611130) 摘要：拟南芥广谱抗病基因RPW8对拟南芥白粉病菌、霜霉病菌和烟草花叶病毒等均具有抗性。为了深入研究其广谱抗病机制，筛选鉴定与RPW8具有直接相互作用的蛋白，我们以含有RPW8的拟南芥纯合转基因系s5为材料，接种拟南芥白粉菌系UCSCl，36h后取样，构建了白粉菌侵染初期的拟南芥eDNA文库。为了提高文库对长片段基因5’端的覆盖率，分别 000 CFU·mL～，插入片段长度在350—2bp之间，平均插入片段大小为750bp。用RPW8。J pGADT7-Rec，滴度为2．5x108 和RPW8．2构建诱饵载体，分别获得11和12个候选互作蛋白。结果表明此cDNA文库质量较好，适用于互作蛋白的筛选。关键词：RPW8；白粉菌；拟南芥；cDNA文库；酵母双杂交 Constructionandutilizationofa from cDNA|．brary yeasttwo．hybrid thalianainfected mildewHUANG bypowdery Yan—yanl，YANGLing—lon92，WANGYin91，LI Research Ranl，LULi—min92，WANGWen—min91(1RiceInstitute，SichuanAgriculturalUniversity，Chengdu611130， of 611130，China) China；2CollegeAgronomy，SichuanAgriculturalUniversity，Chengdu thalianaconfers Abstract：RPW8，a resistancelocusin enhancedresistanceto broad—spectrum Arabidopsis Tobaccomosaicvirus．To its Golovinomycescichoracearum，Hyaloperonosporaparasitica，and identify candidatesthat be for themechanismsofRPW8·-mediated interacting mayhelpfulunderstanding broad·-spectrum thaliana cDNA wasconstructed atan resistance，an library Arabidopsisyeasttwo—hybrid byusingplantseedlings