西瓜细菌性果斑病病菌活细胞PMA-PCR检测方法的建立.pdfVIP

’阖担铒哥卅 2015年第9期 CHINAPLANT ⑩ PROTECTION2015，V01．35．No．9 R 西瓜细菌性果斑病病菌活细胞PMA—PC 检测方法的建立 赵碌源，胡佳续，张 莹，刘 鹏，唐 芳，廖 芳 (天津出入境检验检疫局，天津300461) avegtcle 摘要：利用叠氮溴化丙锭与聚合酶链式反应结合(PMA．PCR)，建立了西瓜细菌性果斑病病菌(Acidovorax subsp．citrulli)活细胞检测方法。实验结果表明，当PMA浓度为0．5mg／mL时，对活细胞DNA的PCR扩增无影响，最 死亡细胞浓度为lxl07cfu／mL时．PMA失去效果。该方法适用于低浓度西瓜细菌性果斑病病菌活细胞的检测。 关键词：西瓜细菌性果斑病病菌；叠氮溴化丙锭；聚合酶链式反应；活细胞检测 中图分类号：S436．42文献标识码：A 文章编号：1672—6820(2015)09—0012—04 Acidovoraxapenae Establishmentofdeteetionmethodforviablecellsof PMA—PCR subsp．c／tru／／／with Zhao Jingyuan，HuJiaxu，ZhangYing，LiuPeng，TangFang，LiaoFang and 300461，China) Entry—ExitInspectionQuarantineBureau，Tianjin (Tianjin for ceilsofAcidovoraxaenae establishedwith Abstract：Detectionmethodviable subsp．citruUi(Aac)was PCR．TheresultsshowedthatPCR ofDNAfromviablecenswasnot pmpidiummonoazide(PMA)and amplification inhibitedPMAwithconcentrationof0．5 minimumdetectableconcentrationofAacwas104cfu／mL．PCR by mg／mL,and PMA ofdeadAac lessthan107cfu／mL． ofDNAfromdeadcellswasinhibited with amplification by suspensions containing x was for PMAtreatmentwasineffectivewith ofdeadAac at1 107cfu／mL．Themethod suspensions containing applicable detectionoflowconcentrationof cellsofAac．