不同一性双胎胎盘IGF-Ⅱ基因印迹、启动子调控及蛋白表达的研究.pdf

◇不一洼双胎删GH…憾启动相控及釉表遮的研究一要 不同一性双胎胎盘IGF．II基因印迹、 启动子调控及蛋白表达的研究 博士研究生：罗艳敏 导 师：庄广伦教授 方群教授 专 业：妇产科学 中【LI大学附属第一医院妇产科胎儿医学中心 摘要 双胎不同一性是多胎妊娠特有的并发症，指双胎在生长发育、基因型和表型 中的不一致，狭义上单指双胎间体重差别大于20％。刁i同一性双胎较发育一致双 胎预后更差，围生期死亡、先天畸形、严重的颅内出血、大脑发育不良、新生儿 窒息以及呼吸窘迫等并发症明显升高。研究双胎不同一性的原因，对针对性地监 测和处理多胎妊娠、改善Jlfi)l,预后有重要意义。 引起双胎不同一性的因素较多，基因组印迹的改变可能是其中较为重要的原 因之一。基因组印迹是近年发现的一种不遵从孟德尔定律、依靠单亲传递的遗传 学现象。印迹基因通过亲缘特异性的表遗传修饰，使一对等位基因呈单等位基因 表达或差异表达——即基因的表达取决于该基因源白父亲或母亲。如果特异性亲 源优先表达基因缺失，包括正常沉默等位基因异常表达，从而导致双等位基因表 达，或使正常表达的等位基因沉默，从而导致后天基因位点沉默，称为印迹丢失。 印迹基因对胚胎形成、胎儿生长、胎盘分化及出生后生长发育、行为等起着关键 作用，这些基因印迹状态的改变与发育异常、某些遗传病和肿瘤发生有关。 factorII，IGF—II)是胎儿 growth 胰岛素样生长因子II(insulin—like 发育和胎盘形成的重要印迹基因，由4个启动子P1、P2、P3、P4调控，父源性 表达。IGF—II的基因印迹特性是发育阶段、组织及启动子特异性的，这使得 TGF—T T的表达及调控十分复杂，尚存在很多不解之谜。胎盘中的IGF—II通过调 节胎盘的形成、生长、对营养的利用和转运，影响胎儿的生长发育。IGF—II基 因印迹丢失可引起胎儿发育异常：该基因启动子突变可导致胎儿生长受限。 II的基因印迹表 有关双胎妊娠IGF-II改变的研究较少。关于双胎胎盘IGF 达及启动子调控，尚未见报道。胎盘IGF—II的表达及调控是否在双合子和单合 予双胎中有所不同?双胎不同一性是否与胎盘IGF—II的基因印迹改变有关?绒 毛膜类型、合子性质和辅助生殖技术是否与基因组印迹的改变有关?这些问题均 有待研究。 本课题的研究目的是： 1．通过检测单胎和双胎胎盘IGF—II基因印迹状态，了解IGFII基因印迹 状态与胎儿发育和双胎不同一性的关系，以及单合子和双合子双胎、辅助生殖与 自然受孕双胎之间IGF—II基因印迹状态的差异。 2．通过检测胎盘IGF—II基因启动子表达活性，探讨双胎IGF—Ii基因启动 子表达与其基因印迹状态的关系。 3．通过检测胎盘组织中IGF—II蛋白表达，了解其在孕晚期不同孕周胎盘细 胞中的水平，比较单胎与双胎、不同一性双胎与正常双胎之间IGF—II蛋白表达 水平的差异。 第1章不同一性双胎胎盘IGF—II基因印迹状态 本研究收集妊娠中晚期双胎病例80对，同期分娩的正常单胎42例，其中正 转录结合聚合酶链反应技术和Apa I限制性内切酶片段长度多态性检测胎盘 中文摘要 不同一性矾脑胎盘fGF—if基因印迹、启动子调控及蛋白表这的研究 IGF—II基因印迹状态。 实验结果： (1)正常双胎胎盘IGF—II基因印迹丢失率为17．6％，较单胎(8．7％)升高， 但无显著性差异(尸0．05)。 (2)胎盘IGF—II基因印迹丢失率在表型不同一性双胎(T2组)