血管活性肠肽受体在人食管下括约肌表达规律功能及研究.pdf

00…………………42 O00ooo00000a…………………………………………………68o····…·……···········…·…··…··…“··………··……700·····…·············……………··……………·76 中文摘要 血管活性肠肽受体在人食管下括约肌的表达规律与功能研究 摘 要 人的食管下括约肌皿ES)是位于食管与胃的交界部位增厚的肌层，宽 约为2—3厘米，由钩状纤维以及套索纤维构成。钩状纤维位于胃小弯侧， 形状为半环形，套索纤维位于胃大弯侧呈斜向分布，钩状纤维和套索纤维 以及膈肌脚在食管胃的结合部位形成高压带，这几种肌纤维成分组成的高 压带使食管下括约肌保持暂时关闭的状态。在静息等一般情况下，人体的 食管与胃的结合部位的抗反流机制是因为人食管下括约肌的收缩引起的； 当进食或呕吐时，食管下括约肌的暂时性舒张使食物进入胃腔，或者胃内 容物反流入食管并经口腔排出。 食管下括约肌的正常功能主要是受到中枢神经系统的支配和控制，除 此以外体液的以及肌源性的因素也参与其功能的调控，从而保证食管下括 约肌发挥正常的生理作用。食管下括约肌运动的神经传导通路包括兴奋性 运动传导通路和抑制性运动传导通路，正是由于这些传导通路的激活促进 了某些神经递质的释放，从而调节食管下括约肌的舒缩功能。兴奋性运动 传导通路的构成包括了节前以及节后胆碱能神经元，激活此兴奋性通路能 促进乙酰胆碱等神经递质的释放，使人LES发生收缩作用。而抑制性运 动传导通路则包括了NANC神经元，激活该抑制性通路能释放一氧化氮、 血管活性肠肽等，使LES产生舒张作用。 近些年来对临床上常见的一些与食管运动障碍有关的疾病的研究揭 示了这些疾病都与食管下括约肌功能失调有关。为了更好的解释这些疾病 的发病原理，从而找到针对它们的最佳的治疗方法，所以理应深入的研究 食管下括约肌的调节机制。已有研究显示多种神经递质和受体参与了食管 下括约肌舒张、收缩功能的调节，目前已知的研究成果包括一氧化氮、多 巴胺受体、胆囊收缩素受体等。 intrestinal 血管活性肠肽(vasoactine 物质，它的生理作用的突出特点之一就是对人和动物多种组织和器官内的 血管有显著的扩张的功效。血管活性肠肽与其相应受体结合后发挥生理功 能，其介导的生物学活性也多种多样，参与人体心脑血管功能调节、激素 中文摘要 分泌、中枢神经系统调节、免疫功能调节及抑制胃肠平滑肌和食管下括约 肌张力等作用。根据国际药理学协会的命名规则，把血管活性肠肽受体 受体的分布。 1、VPAC2 和PACl受体在人食管下括约肌的表达情况，使用肌条张力测定和电场刺 管下括约肌收缩和舒张等功能的影响，探索了VIP受体对人食管下括约 肌的收缩和舒张功能产生的影响，对于临床上常见的食管运动障碍性疾病 的发病原理和进一步行针对性的治疗具有较重要的意义。 第一部分人食管下括约肌血管活性肠肽受体的表达规律 目的：本试验首先使用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定血管活性 约肌钩状纤维和套索纤维及对照组的mRNA的表达规律，而后使用蛋白 位的受体蛋白的表达规律，从而为以后深入探讨VIP受体的功能调节作 用打下一定的基础。 方法：从2011年8月到2012年1月之间选择因高位胸中段食管癌在 河北医大附属四院行食管切除及消化道重建术的病人30例，在这30例行 以上手术方法治疗的病人中包括男性病人以及女性病人各15例，平均为 62岁。使用术中切下的食管与胃交界部位的人体组织作为试验用标本， 用刀片将上至食管下端下至胃近端之间组织的粘膜和粘膜下层剔除掉并 注意保护肌层不被破坏，在食管下端与近端胃交接部位明显增厚的环形肌 束就是食管下括约肌(LES)，其中食管下括约肌的钩状纤维处在胃小弯侧 的位置，而食管下括约肌的套索纤维处在胃大弯侧的位置，分别制成四种 肌组织的标本为下一步试验做准备，分别是食管下括约肌的钩状纤维标本 和套索纤维标本，对照组的两种肌组织则采用胃底部环形肌以及食管体部 环行肌。被肿瘤组织侵犯的标本弃之不用。提取以上肌条的组织RIgA后， 合酶链反应的方法