硫化氢对大鼠局灶性脑缺血脑线粒体损伤影响.pdf

中文摘要 硫化氢对大鼠局灶性脑缺血脑线粒体损伤的影响 摘 要 脑缺血疾病是目前严重危害人类健康的主要疾病之一，具有发病率 高、致残率高、死亡率高的特点。脑缺血后引起一系列病理生理方面的改 变，而影响脑缺血损伤的机制较复杂，包括兴奋性损害、Ca2+超载、自由 基及脂质过氧化、线粒体功能障碍、NO、细胞凋亡，细胞因子等，这些 因素之间可能还存在相互作用。因此探索脑缺血的病理生理过程，研究抗 脑缺血损伤的药物越来越受到重视。随着研究深入，发现硫化氢(hydrogen oxide，NO)和一氧化碳(carbon 尤其是内源性H2S作为一种新型神经活性物质，对中枢神经系统功能有 着重要的调节作用。内源性H2S在哺乳动物体内的产生主要有3条途径， sulfur ptopyruvat amino (cysteine 底物，生成H2S。研究发现H2S参与脑缺血性损伤的发生，且在脑缺血性 损伤时呈现动态变化过程；有学者发现H2S可通过对抗线粒体氧化应激 作用，保护神经细胞避免氧化损伤，因此我们建立大鼠局灶性大脑中动脉 cerebral 栓塞(middle artery 血过程中不同时间内源性H2S含量与3MST活性的变化，在此基础上给 予大鼠H2S的供体一硫氢化钠(sodium 后脑组织线粒体损伤的影响。 第一部分 局灶性脑缺血大鼠脑组织硫化氢与3一巯基丙酮酸硫转移酶 的变化 目的：观察大鼠局灶性脑缺血过程中不同时间内源性H2S含量与 3MST的变化。 中文摘要 分为：①假手术组×2：仅做颈部手术，不插入线栓。②缺血lh组×2；③ 血24h组×2。假手术组共48只(不同时间点各8只)，其余各组各8只。 其中96只观察计算梗死体积，另96只测定其他指标。 0％水合氯醛 采用Zea-Longa等线栓法建立局灶性脑缺血模型，大鼠1 麻醉，消毒皮肤，取颈正中切口，分离组织，游离左侧颈总动脉(common carotid carotid artery,CCA)、颈外动脉(externalartery，ECA)、颈内动脉 carotid (internal 脉的交通支，结扎颈外动脉远心端，电灼断，在结扎部位近心端剪一小口 入栓塞线，栓线进入颈内动脉，直至大脑中动脉的起始处，长度约18．5mm 左右。假手术组只做颈部手术，游离血管，但不插入线栓。参照Longa 评分法，对大鼠进行神经功能缺损程度的评分，以判定模型是否成功。分 h、3h、6h、9h、12h和24 别于术后1 h后断头取脑，脑组织切片染色， 研究方法并改良测3一巯基丙酮酸硫转移酶的活性。 结果： 1假手术组神经功能正常。与相应的假手术组比较，缺血lh组无明显 神经功能缺损症状，从缺血3h至U24h，出现不同程度的神经功能缺损症状。 2假手术组大鼠脑组织无梗死。与相应的假手术组比较，缺血1h时 大鼠脑组织无明显梗死，缺血3h时出现梗死灶，随着时间的延长，缺血 6h、9h、12h和24h时梗死灶逐渐增大愀0．01)。 中H2S含量和3MST活性均明显降低(PO．05或P0．01)。 小结：通过建立大鼠局灶性大脑中动脉栓塞模型，观察了大鼠体内， H2S含量和3MST活性在缺血不同时间的动态变化及脑组织梗死体积的改 显降低，脑组织梗死体积逐渐增大，提示H2S与3MST参与了局灶性脑 缺血的发生发展。 第二部分硫化氢对局灶性脑缺血大鼠脑线粒体功能的影响 中文摘要 目的：观察H2S对大鼠局灶性脑缺血后脑线粒体功能的影响。 塞(MCAO)模型。假手术组只做颈部手术，游离血管但不插入线栓。术后 神经元线粒体超微结构改变的影响。采用差速离心法提取神经元线粒体， 测定线粒体的活力、线粒体膜肿胀度，以及线粒体总ATP酶、超氧化物 结果： 1与假手术组大鼠比较，缺血组大鼠出现明显脑梗死灶