毛冬青甲素对大鼠脑缺血再灌注后VEGF和VEGFR2表达神经元再生影响.pdfVIP

毛冬青甲素对大鼠脑缺血再灌注后 VEGF 和 VEGFR2 的表达及神经元再生的影响 摘 要 目的：探讨毛冬青甲素（Ilexonin，IA ）对大鼠脑缺血再灌注后 VEGF 和 VEGFR2 的表达及神经元再生的影响的可能作用机制。 方法：线栓左侧大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO ） 制成 SD 大鼠脑缺血模型，随机分成：正常组、假手术组、模型组、IA 治疗组（分 IA71 、142、285μmol·kg- 1 三个亚组）等 4 组。采用 Longa 评分法进行大鼠神经 功能评分； TTC 染色法观察脑缺血再灌注模型组和治疗组缺血灶情况；免疫组 化检测缺血再灌注后不同时段各组缺血周边区 VEGF 、VEGFR2 阳性细胞数的变 化；免疫荧光检测缺血再灌注后不同时段各组脑侧室室管膜下区(SVZ) 神经元 再生标记物 Nestin 阳性细胞数的变化；免疫印迹法检测缺血再灌注后不同时段各 组缺血周边区 VEGF 、VEGFR2 及脑侧室室管膜下区 (SVZ)神经元再生标记物 Nestin 蛋白的表达情况。并比较不同剂量（IA71 、142、285μmol·kg- 1 ）的IA 干 预对大鼠神经功能缺损评分，缺血区周边组织 VEGF 、VEGFR2 及 SVZ 的Nestin 蛋白表达和阳性细胞数的影响。 结果：脑缺血再灌注后 3d，模型大鼠神经功能缺损评分较高（P0.05 VS 14d 、 28d ）；VEGF 、VEGFR2 、Nestin 阳性细胞在正常组及假手术组散在见到，模型 组 7d 达到高峰，随时间延长其表达逐渐减少；VEGF 、VEGFR2 、Nestin 蛋白于 正常组及假手术组表达较少，模型组自第 3d 有一定量的表达，第 7 天表达最多， 之后逐渐减少，至 28 天仍有表达。模型组 7d 与相应模型组其它时段比较 P0.05 。 经不同剂量 IA71 、142、285μmol·kg- 1 干预后，大鼠神经功能缺损评分有明显下 降；缺血周边区 VEGF 、VEGFR2 及 SVZNestin 蛋白表达和阳性细胞数明显增多， 与模型组相应时间点比较显著性差异（P0.05 ）。以285μmol·kg- 1 作用为著。 结论：1、脑缺血再灌注损伤可诱导 VEGF 、VEGFR2 的早期表达(至少 14d)， VEGF 、VEGFR2 的早期应激表达可能与及时挽救缺血周边组织神经元的存活和 再生进而促进神经功能恢复有关。2、毛冬青甲素可以促进缺血周边组织 VEGF 、 VEGFR2 表达(至少 14d)，其机制可能通过上调VEGF 、VEGFR2 表达促进神经 4 元的存活和再生进而发挥其神经保护作用。 关键词： 毛冬青甲素 脑缺血再灌注 血管内皮生长因子 血管内皮生长 因子受体2 神经元再生 5 The impact of Ilexonin A on expression of VEGF, VEGFR2 and Neurogenesis after Cerebral Ischemia-Reperfusion in Rats ABSTRACT OBJECTIVE To explore the effect of IlexoninA on expression of VEGF, VEGFR2 and neurogenesis and its possible mechanism after cerebral ischemia- reperfusion in Rats. METHODS The model of Middle cerebral artery occlusion(MCAO) was established to transient focal