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脊髓TLR9在人鼠胫骨癌痛中的作用及电针作用观察 中文摘要 脊髓TLR9在大鼠胫骨癌痛中的作用及电针作用观察 由外周神经损伤、炎症和肿瘤引起的神经病理性疼痛、炎症痛和癌痛是最常 见的三类慢性痛。现今癌症已成为威胁人类生存的重要疾病之一。众所周知，肿 瘤引起的疼痛严重破坏了患者的生活质量，其中以由乳腺癌、前列腺癌、肺癌和 卵巢癌骨转移引起的骨癌痛最为常见，也最为严重。有研究认为，癌痛可能有神 经痛和炎症痛两种成分存在，但与炎症痛和神经痛又不完全相同。在癌痛早期， 由于肿瘤与周围组织释放炎性因子而表现出与炎症痛相似的症状；在癌痛晚期由 于肿瘤细胞的生长浸润引起神经压迫和损伤，从而表现出与神经痛类似的症状。 这提示癌痛机理有其独特性和复杂性。因此将癌痛与神经痛、炎症痛做比较性研 究对揭示癌痛独特的机理有重要的理论和临床意义。 like ToU样受体(Toll 跨膜受体蛋白，已经发现其13个家族成员。它们主要通过识别保守的病原相关 Molecular Pattern，PAMP)，感知病原微生物的存 分子模式(Pathogen—Associated 在，对其产生免疫炎症反应。最近发现TLRs还能识别受损细胞或坏死细胞来源 的内源性危险信号。这些内源性危险信号和PAMP类似，在外周可以促进抗原 cells，APC)的成熟进而激发T细胞免疫应答。热 呈递细胞(antigen．presenting shock 休克蛋白(Heat differemiation 结合后，能通过髓样分化因子(myeloid 游信号通路。已有研究发现中枢神经系统内的TLR2和TLR4在炎症痛与神经痛 的发生发展中有重要的作用，我实验室前期的工作也发现TLR4在癌痛的发生与 维持中发挥着关键性作用。TLR9是TLRs家族中重要一员，近来研究发现TLR9 不仅在外周免疫细胞中表达，在中枢神经系统内也有广泛表达，并能调节下游的 IL．1B、TNF．a等炎性细胞因子，这些炎性因子在痛觉敏化的过程中有重要的作 用。那么脊髓TLR9在癌痛的发生与发展中作用如何昵?因此本研究深入地观察 了TLR9在癌痛中的作用。 祖国医学对疼痛有着深刻的认识，《黄帝内经》认为疼痛产生的重要原因是 “经脉流行不止，环周不休，泣而不行，脉中则气不通，故卒然而痛。”，此外 “风、寒、湿三气杂至合而为痹”。因此“不通则痛”，淤血阻滞，痰凝积结，湿 脊髓TLR9在大鼠胫骨癌痛中的作用及电针作用观察 邪内阻，毒火结聚等阻滞经络，引起疼痛。针刺是祖国医学的精华之一，具有作 用广，毒副作用小，经济简便等优点。针刺能够疏通经络，调节气血。大量的临 床实践证明，针刺疗法对急、慢性疼痛均有良好的治疗效果，但是针刺对骨癌痛 的镇痛作用尚存在争议，针刺镇痛的机理也不是十分清楚。因此本研究观察了电 针对不同性质疼痛的镇痛作用，以期进一步阐述骨癌痛的独特机理并探索针刺镇 痛新的机理。 综上所述，本论文拟开展下列研究： 1．建立癌痛、炎症痛和神经痛模型并比较其行为学差异 (1)参照本研究组毛应启梁等之前的报道，建立大鼠胫骨癌痛模型。采用机 械性痛觉超敏与热痛觉过敏等指标检验其行为学特征。 (2)建立新的大鼠胫骨炎症痛模型。采用病理学、血常规分析、免疫荧光、 机械性痛觉超敏与热痛觉过敏等方法对其进行评价并检验其行为学特征。 nerve (3)参照Woolf等建立的SNI(sparedinjury)模型，并进行改进，新建 大鼠胫神经病理性疼痛模型，并采用机械性痛觉超敏与热痛觉过敏等指标检验其 行为学特征。 (4)通过给予三种疼痛模型大鼠抗炎镇痛药塞来昔布灌胃治疗，比较三种疼 痛模型大鼠对塞来昔布的镇痛敏感性。 2．比较脊髓TLR9在三种疼痛模型中的作用及其机制 (2)运用Western Blot方法在蛋白水平比较TLR9在三种疼痛模型中表达变 化。 (3)采用免疫荧光双标的